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猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化
  • ISSN号:1004-3268
  • 期刊名称:《河南农业科学》
  • 时间:0
  • 分类:S828[农业科学—畜牧学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]郑州大学生物工程系,河南郑州450001, [2]河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30730068)
中文摘要:

为了解nsp7重组蛋白的免疫学活性,采用RT-PCR的方法从猪繁殖与呼吸道综合症病毒(PRRSV)BJ-4毒株中扩增得到nsp7基因,将基因连接到pET-28a载体并转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达,利用Ni-NTA进行亲和纯化,通过SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行分析和鉴定,通过间接ELISA方法研究了重组蛋白的免疫学活性。结果表明,成功制备了nsp7重组蛋白,间接ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,为建立nsp7特异性抗体的间接ELSIA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础。

英文摘要:

To investigate the immunological activity of nsp7 recombinant protein,the PRRSV BJ-4 nsp7 gene amplified by RT-PCR was sub-cloned into the Escherichia coli expression vector pET-28a.The recombinant protein was expressed in E.coli BL21(DE3) and purified by Ni-chelation.After purification,the recombinant protein was analyzed by SDS-PAGE and western blot.The immunogenicity of nsp7 protein was evaluated by ELISA.The results showed that the nsp7 protein was expressed successfully and the recombinant protein had immunological activity which could be recognized by the porcine positive serum.This assay provided theoretical support for constructing indirect-ELISA of nsp7 recombinant protein.

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期刊信息
  • 《河南农业科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:河南省农业科学院
  • 主办单位:河南省农业科学院
  • 主编:张新友
  • 地址:郑州市花园路116号
  • 邮编:450002
  • 邮箱:hnnykx@163.com
  • 电话:0371-65739041
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-3268
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1092/S
  • 邮发代号:36-32
  • 获奖情况:
  • 全国中文核心期刊,全国农业优秀期刊,连续四届被评为河南省优秀期刊...,全国期刊方阵双效期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 英国农业与生物科学研究中心文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:27029