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新疆杏品种自交不亲和S-RNase基因PCR扩增体系的优化
  • ISSN号:1007-7383
  • 期刊名称:石河子大学学报(自然科学版)
  • 时间:0
  • 页码:418-421
  • 语言:中文
  • 分类:S611.2[农业科学—园艺学]
  • 作者机构:[1]石河子大学农学院,石河子832003
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30370992); 国家高技术研究发展计划项目(2008AA10Z109); 国家科技支撑计划项目(2007BAD36B06)
  • 相关项目:新疆主栽杏品种自交不亲和S-基因的系统检测及克隆
作者: 冯建荣|
中文摘要:

以3个新疆杏品种的叶片为试材,以其叶片基因组DNA为模板,分别对PCR扩增体系中的10×Buffer(含Mg2+)、dNTP、上下游引物、TaqDNA聚合酶和退火温度5个因素设计6个梯度,研究了新疆杏品种自交不亲和S-RNase基因PCR扩增条件,建立其优化的PCR扩增体系。研究结果表明:其扩增程序为94℃预变性5min,94℃变性45s,52℃退火45s,72℃延伸2min,35个循环后72℃延伸10min,25μL反应体系10×Buffer(含Mg2+)2.5μL,dNTP0.08mmol/L,上下引物0.16μmol/L,DNA80ng,DNA聚合酶1μL,此为最优的反应体系。

英文摘要:

In this experiment,the leaves of three Xinjiang apricot cultivas were used as test materials,and their DNAs were used as templates,6 levels of 10×buffer,primer,dNTP mixture,DNA polymerase and annealing temperature were set in this experimentation to study the PCR amplification conditions of self-incompatibility S-RNase gene in Xinjiang apricost and establish optimal PCR ampilification system.The results showed that the amplification program was 94 ℃ predegradation for 5 min,94 ℃ degradation for 45 s,52 ℃ anneal for 45 s,72 ℃ extension for 2 min,after 35 cycles 72 ℃ extension for 10 min;the 25 μL reaction mixture contained 10×Buffer (include Mg2+) 2.5 μL,dNTP mixture 0.08 mmol/L,each primer 0.16 μmol/L,DNA 80 ng,Taq DNA polymerase 1 μL,which is the optimum system.

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期刊信息
  • 《石河子大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:
  • 主办单位:石河子大学
  • 主编:向本春
  • 地址:新疆石河子市北四路
  • 邮编:832003
  • 邮箱:xuebaozrb@shzu.edu.cn
  • 电话:0993-2058977
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7383
  • 国内统一刊号:ISSN:65-1174/N
  • 邮发代号:58-174
  • 获奖情况:
  • 2006、2008、2010、1012年荣获“首届中国高校特色...,在新疆第三次优秀科技期刊评比中荣获新疆科技期刊...,在第四、五、六、七次获综合效益奖及二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:8226