位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
抗菌肽重组逆转录病毒载体的构建、重组病毒的包装及其在牛奶中的稳定表达
  • ISSN号:1005-4545
  • 期刊名称:《中国兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学] S823[农业科学—畜牧学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130062
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30471280)
中文摘要:

将含有双抗菌肽基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLN—bcp—LK(R)中,获得了含有双抗菌肽基因的重组逆转录病毒载体pLN—bcp-LfcinB-CE-MA(R),利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后,用病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×10^4CFU/mL,用病毒上清转染妊娠中后期奶牛乳腺组织,产犊后采集的奶样经琼脂板溶圈法和Tricine-SDS-PAGE检测,结果表明乳汁中表达的抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有明显地抑菌活性,并能实现相对稳定的表达,表达可持续30-45d。

英文摘要:

Antimicrobial peptide genes were cloned into the retroviral vector pLN-bcp-LK(R) to construct the recombinant retroviral vector pLN-bcp-LfcinB-CE-MA(R). The vector were transfected into PA317 cells for packaging by liposomal transfection,after G418 selection for 2 weeks,G418-resistant PA317 colonies were obtained and amplified. The supernatant of cell culture was harvested and infected NIH3T3 cells,as were to measure the viral titer of recombinant retrovirus, results showed that the highest titer of viral supernatant was 1 × 10^4 CFU/mL. The result of Tricine-SDS-PAGE and inhibition zone assay showed that antimicrobial peptides genes had been expressed continuously in milk of the post partum cow,the expression of antibacterial proteins persisted for 30-45 days. Inhibition zone assay suggested that the milk samples also revealed the bacteriostatic activity.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《中国兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:吉林大学
  • 主编:王哲
  • 地址:吉林省长春市西安大路5333号
  • 邮编:130062
  • 邮箱:xbcjvs@163.com
  • 电话:0431-87836531 87836534
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-4545
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1234/R
  • 邮发代号:12-105
  • 获奖情况:
  • 第二届全国优秀科技期刊评比二等奖,连续多次被评为全军优秀医学期刊一等奖,全国高校优秀自然科学学报评比一等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18973