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L-plastin启动子调控下的肿瘤细胞特异性表达载体的构建及活性分析
  • ISSN号:1000-8179
  • 期刊名称:《中国肿瘤临床》
  • 时间:0
  • 分类:R737.25[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室, [2]吉林大学基础医学院免疫学教研室,长春市130021, [3]吉林大学第一医院普外科, [4]吉林大学中日联谊医院神经外科
  • 相关基金:本文课题受国家自然科学基金青年科学基金(编号:30200256)和吉林省科技发展计划项目基金资助(编号:20010423)
中文摘要:

目的:构建肿瘤细胞特异性表达载体pcDNA3.1PLN-GFP及鉴定活性。方法:用2.4kb的L-plastin启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告蛋白,通过分子克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1PLN-GFP,用脂质体介导法转染肿瘤细胞和成纤维细胞后,流式细胞术(FACS)分析载体的肿瘤细胞特异性和活性。结果:仅在表达内源性L-plastin的肿瘤细胞和转化的293细胞中有GFP的表达,发光细胞比率较高,而且L-plastin启动子的活性与CMV启动子活性相当,而在其它细胞中没有检测到GFP的表达。结论:我们构建的pcDNA3.1PLN-GFP是一肿瘤特异性的高效表达载体。

英文摘要:

Objective:To construct the tumor cell-specific expression vector pcDNA3.1PLN-GFP and analyze its activity.Methods:The 2.4 kb L-plastin promoter was used as a promoter and green fluorescent protein(GFP)was used as reporter to construct the expression vector pcDNA3.1PLN-GFP with molecular cloning techniques.The recombinant plasmid was transfected into tumor cells and murine fibroblasts with lipofectin.The tumor specificity and activity of this vector were analyzed by fluorescence activated cell sorting.Results:L-plastin GFP protein was expressed only in tumor cells and transformed HEK293 cells that expressed the endogenous L-plastin gene.Its activity was equivalent to that found with a vector containing the CMV promoter.Conclusion:The pcDNA3.1PLN-GFP vector is an efficient tumor cell-specific expression vector.

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期刊信息
  • 《中国肿瘤临床》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国抗癌协会
  • 主编:郝希山
  • 地址:天津市河西区体院北环湖西路天津肿瘤医院C楼3层
  • 邮编:300060
  • 邮箱:cjco@cjco.cn
  • 电话:022-23527053
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8179
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1099/R
  • 邮发代号:6-18
  • 获奖情况:
  • 1997、1999、2001三次获中国科协优秀期刊奖励基金,2001年获天津市科技期刊一等奖,1996年获中国科协优秀期刊三等奖,2011年天津市优秀期刊提名奖,2011年中国精品科技期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:37940