研究苏云金芽孢杆菌原生质体制备与再生的最佳条件,为进一步提高原生质体转化率打下基础。通过酶解法对苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种工业生产菌株(Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki)2671原生质体的制备及再生条件进行了研究,考察了菌体生长状态、溶菌酶浓度、处理时间等影响因素,采用PEG法对大质粒进行原生质转化。结果表明,对数生长前期的菌体(培养3h),以SMML作渗透压稳定剂,溶菌酶浓度7mg/mL,40℃下酶解40min,原生质体生成量可达5.7×107个/mL,再生率可达14.1%。在此条件下,采用PEG法可将大质粒pLTVl-ep成功转化宿主菌,转化率为0.3 CFU/μg。