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表达浑球红细菌hemA基因生产5-氨基乙酰丙酸的研究
  • ISSN号:1007-7146
  • 期刊名称:《激光生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]安徽农业大学作物生物学省重点实验室,安徽合肥230036
  • 相关基金:国家高技术研究发展计划项目(863计划)(2008AA102408);国家自然科学基金项目(10675002)
中文摘要:

5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinate acid,ALA)在农业,工业,医药业具有广泛的应用。ALA由5-氨基乙酰丙酸合酶(5-aminolevulinate acid synthase, ALAS)催化产生,其生物合成受终产物血红素的反馈抑制。本研究克隆一种浑球红细菌的hemA基因,序列分析其与已报道的基因具有96%的同源性,蛋白质编码区域也发生改变,并利用生物信息学软件进行同源关系的分析。采用大肠杆菌重组技术,构建表达载体pET28a—hemA,表达了有活性的浑球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)的ALAS,研究了IPTG诱导和PH对研究ALAS的影响,同时分析了重组菌株合成ALA的能力,测定胞外产量。结果表明,在PH6.5,30mmol/L琥珀酸和60mmol/L甘氨酸培养条件下,胞外ALA的最大合成量达到669mg/L。

英文摘要:

5-aminolevulinic acid (5-aminolevulinate acid, ALA) is widely used in agriculture, industry and pharmaceutical industry. ALA is catalysed by 5-aminolevulinate acid synthase (ALAS) , whose biosynthesis is feedback inhibited by its end product berne. In this study, we cloned hemA gene from Rhodobacter sphaeroides. The sequence analysis has a 96 % homology with reported gene and its protein-coding region also changed. We also used bioinformatics soft-ware for homology analysis. With E. coli recombinant techniques, we constructed a pET28a-hemA vector, expressed ALAS of active Rhodobacter sphaeroides and studied the impact of IPTG induction and PH on ALAS research. Also we studied the ability of ALA synthesis with recombinant strains and determined the extracellular ALA production. The result shows that in PH6.5, 30 mmol/L succinate and the 60 mmol/L glycine-culture conditions, the maximum synthesis of extracellular ALA reached 669 mg/L.

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期刊信息
  • 《激光生物学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国遗传学会
  • 主编:胡能书
  • 地址:长沙市麓山路36号湖南师范大学生命科学学院内
  • 邮编:410081
  • 邮箱:jgswxb@hunnu.edu.cn
  • 电话:0731-8872208
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7146
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1264/Q
  • 邮发代号:42-194
  • 获奖情况:
  • 2000年12月荣获首届《CAI-CD》执行优秀奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:5516