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MicroRNA-30a在胃癌组织的表达分析及其靶基因成纤维活化蛋白α的鉴定
  • ISSN号:1000-5404
  • 期刊名称:《第三军医大学学报》
  • 时间:0
  • 分类:R394.3[医药卫生—医学遗传学;医药卫生—基础医学] R730.23[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室暨国家免疫生物制品工程技术研究中心,重庆400038
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(81202310); 重庆市青年科技人才培养项目(CSTC2014kjrc-qnrc10008)
中文摘要:

目的分析microRNA-30a(miR-30a)在胃癌中的表达水平并鉴定其新的靶基因。方法选取29例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,利用qRT-PCR检测miR-30a的表达。通过miRNA靶基因预测数据库Target Scan预测miR-30a的靶基因。构建含有miR-30a结合位点的3'UTR片段的荧光素酶载体(p MIR-FAPα),通过荧光素酶报告实验对预测靶基因进行检测。利用Western blot和qRT-PCR对预测靶基因成纤维活化蛋白α(fibroblast activation proteinα,FAPα)的表达进行检测。结果 miR-30a在胃癌组织样本中的表达明显下调,通过生物信息学预测(Target Scan)和荧光素酶实验表明miR-30a mimic可与FAPα基因结合,qRT-PCR和Western blot结果表明miR-30a mimic可抑制FAPαmRNA和蛋白质水平的表达。结论 miR-30a在人胃癌组织样本中表达下调,FAPα是其靶基因。

英文摘要:

Objective To investigate the expression of microRNA-30a (miR-30a) in human gastric cancer (GC) tissues and identify its direct target gene. Methods The expression of miR-30a in the tumor tissues and paratumor tissues of 29 patients with GC was detected by qRT-PCR. The potential target genes of miR-30a were predicted with TargerScan database. Luciferase reporter plasmid pMIR-fibroblast activation protein α (FAPα) with FAPα 3′UTR as the binding site of miR-30a was constructed. The predicted target gene (FAPα) of miR-30a was identified by dual luciferase activation assay. The mRNA and protein expression levels of FAPα were assessed by qRT-PCR and Western blotting, respectively. Results The expression of miR-30a was significantly decreased in the tumor tissues compared with the paratumor tissues. Low expression of miR-30a in the tumor tissues was significantly correlated with the clinical stage. MiR-30a mimic significantly inhibited luciferase activation (P〈0.05) in the HEK293 cells, which proved that miR-30a could target FAPα 3′UTR. Western blotting and qRT-PCR showed that miR-30a inhibited the mRNA and protein expression levels of FAPα. Conclusion MiR-30a is down-regulated in GC, and FAPα is its target gene.

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期刊信息
  • 《第三军医大学学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学
  • 主编:钱桂生
  • 地址:重庆市沙坪坝区高滩岩30号第三军医大学学报编辑部
  • 邮编:400038
  • 邮箱:aammt@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023- 68752187
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-5404
  • 国内统一刊号:ISSN:50-1126/R
  • 邮发代号:78-91
  • 获奖情况:
  • 先后20余次获全国、全军、教育部和省、市优秀科技...,2003年、2005年两度被评为"国家期刊奖百种重点科...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:47530