采用无溶剂体系,对固定化洋葱假胞菌脂肪酶催化转酯化菜籽油和甲醇合成生物柴油的工艺进行了考察。优化的转酯化反应条件为:醇油比4:1,含水量4%,固定化脂肪酶10%,反应温度50℃.12h后转化率达到了93.6%。固定化脂肪酶具有良好的操作稳定性,经多次使用后活力未见显著的下降。