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斑点叉尾鮰病毒“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达检测
  • ISSN号:1674-3075
  • 期刊名称:水生态学杂志
  • 时间:0
  • 页码:84-88
  • 分类:Q343.1[生物学—遗传学]
  • 作者机构:[1]华中农业大学水产学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,湖北武汉430070
  • 相关基金:国家自然科学基金(30901118); 教育部新教师基金(20070504047); 湖北省自然科学基金(2008CBB099); 华中农业大学教师启动基金(2006XRC047)
  • 相关项目:基于SVCV/G的假型杆状病毒构建及其在鱼用疫苗研究中的应用
中文摘要:

根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到"自杀性"DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1(+)中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰(Ictalurus punc-tatus)"自杀性"DNA疫苗ps-ORF6与常规DNA疫苗pcd-ORF6,利用转化后的大肠杆菌菌液为模板进行PCR扩增、提取质粒酶切鉴定以及序列测定等方法证实重组质粒构建正确。将重组质粒转染人胚肾细胞(293T),间接免疫荧光试验表明ORF6均获得表达,但"自杀性"DNA疫苗的表达效果不如常规DNA疫苗,该研究为这2种疫苗进一步的鱼体试验奠定了基础。

英文摘要:

In this study,suitable primers were designed according to channel catfish virus(CCV)ORF6 gene sequence.The gene was cloned into suicide DNA vaccine vector pSFV and conventional DNA vaccine vector pcDNA3.1(+)respectively.After transformation into E.coli DH5α and extraction plasmids,the suicide DNA vaccines ps-ORF6 and conventional DNA vaccine pcd-ORF6 were constructed.The CCV ORF6 gene was correctly inserted into vector respectively,confirmed by PCR,double enzymes digestion and DNA sequencing.The recombinant plasmids were transfected into 293T cells.Indirect immunofluorescence assay showed that ORF6 were expressed in both vaccines,but the express level of the suicide DNA vaccine was not as good as the conventional DNA vaccine.The study provides the basis for the further fish test of two vaccines.

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期刊信息
  • 《水生态学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国水利部
  • 主办单位:水利部中国科学院 水工程生态研究所
  • 主编:常剑波
  • 地址:武汉市武昌雄楚大街578号
  • 邮编:430079
  • 邮箱:sstx@mail.ihe.ac.cn
  • 电话:027-82926630
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-3075
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1785/X
  • 邮发代号:38-76
  • 获奖情况:
  • 中国水产核心期刊,湖北省一级优秀期刊,水利部优秀期刊,自然科学核心期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:3619