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农杆菌介导的刺芹侧耳遗传转化体系的建立
  • ISSN号:1672-6472
  • 期刊名称:《菌物学报》
  • 时间:0
  • 分类:S513[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]吉林农业大学农学院,吉林长春130118, [2]吉林农业大学食药用菌教育部工程中心,吉林长春130118
  • 相关基金:国家重点基础研究发展计划(2014CB138305); 国家自然基金项目(31471926); 省技厅项目(20140101149JC)
中文摘要:

以刺芹侧耳菌丝球为受体,潮霉素(Hyg)为筛选标记,应用农杆菌介导法对刺芹侧耳菌丝进行了遗传转化研究。潮霉素敏感性测试结果表明,刺芹侧耳Hyg耐受浓度为50mg/L。农杆菌介导的刺芹侧耳菌丝最佳遗传转化体系为:菌液浓度OD600=0.6–0.7,侵染时间30–35min,共培养时间2d,侵染液和共培养培养基中乙酰丁香酮(AS)浓度为1mg/m L;经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定和GUS活性的组织化学分析,表明外源基因GUS已转入到刺芹侧耳菌丝中,并获得表达。本实验成功地建立了稳定的农杆菌介导的刺芹侧耳遗传转化体系。

英文摘要:

The mycelial pellets of Pleurotus eryngii were used as receptor for transformation by Agrobacterium-mediated method, and the genetic transformation system of P eryngii was established. Sensitivity test showed that the tolerance concentration for P eryngii against hygromycin was 50mg/L. The optimum genetic transformation system for Agrobacterium-mediated P eryngii mycelia was OD6oo=0.6-0.7 of the bacterial concentration, 30-35min of infection duration, 2 days of the co-cultivation period and lmg/mL of acetosyringone (AS) concentration. The results of PCR identification and the histochemical analysis of 13-glucuronidase (GUS) activities indicated that the exogenous gene gus was transferred into the mycelia of P. eryng/i by hygromycin resistance selection. A stable Agrobacterium-mediated genetic transformation system of P eryngii was constructed successfully

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期刊信息
  • 《菌物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院微生物研究所 中国菌物学会
  • 主编:戴玉成
  • 地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所B401
  • 邮编:100101
  • 邮箱:jwxt@im.ac.cn
  • 电话:010-64807521
  • 国际标准刊号:ISSN:1672-6472
  • 国内统一刊号:ISSN:11-5180/Q
  • 邮发代号:2-499
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:5637