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人CYP2D6基因体外表达体系和功能研究方法的建立
  • ISSN号:1000-2537
  • 期刊名称:《湖南师范大学自然科学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]上海交通大学Bio-X研究院上海交通大学生命科学技术学院,中国上海200030
  • 相关基金:国家863计划资助项目(2012AA02A515);国家973计划资助项目(2010CB529600);国家关键技术研究资助项目(2012BA101809)
中文摘要:

根据GeneBank数据库中人CYP2D6基因构建表达载体pMA91-CYP2D6,转化酵母细胞AH22在体外进行表达,抽提所表达的CYP2D6微粒体蛋白进行WesternBlot验证表明表达成功.该微粒体蛋白与探针药物异喹胍反应,利用HPLC检测生成产物4-羟基异喹胍,通过分析其得到酶动力学参数R=10.14±0.94μmol/L,最终建立起完整的人CYP2D6表达体系和功能研究方法,为未来测定CYP2D6各等位基因对应酶的活性,实现临床个性化用药奠定基础.

英文摘要:

According to the GeneBank databases of human CYP2D6 gene, expression vectors pMA91- CYP2D6 were constructed by transforming the yeast cell AH22 to express CYP2D6 protein, and Western Blot resuits verify that the expression was successful in yeast cells. The microsomal protein was reacted with probe drugdebrisoquine to produce product 4-hydroxy debrisoquine, and its enzyme kinetic parameter Km, = 10.14 ± 0.94 μmol/L was obtained. Ultimately CYP2D6 expression system and functional study methods were established. This work would be a useful basis for evaluating the enzyme activity of CYP2D6 alleles and clinical personalized medicine.

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期刊信息
  • 《湖南师范大学自然科学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:湖南师范大学
  • 主办单位:湖南师范大学
  • 主编:杨春明
  • 地址:湖南长沙岳麓山湖南师范大学期刊社
  • 邮编:410081
  • 邮箱:xbz@hunnu.edu.cn
  • 电话:0731-8872473
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2537
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1065/N
  • 邮发代号:42-96
  • 获奖情况:
  • 全国优秀科技期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:4771