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NOX家族在X射线诱导PC-3细胞损伤中的作用

ISSN号：1004-616X
期刊名称：癌变·畸变·突变
时间：0
页码：30-38
分类：R818.03[医药卫生—放射医学;医药卫生—临床医学]
作者机构：[1]兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所,兰州730000, [2]中国科学院近代物理研究所重离子辐照生物医学研究中心,兰州730000, [3]上海理工大学医疗器械与食品学院,上海200093, [4]西北民族大学医学院机能教研室,兰州730030, [5]甘肃省出入境检验检疫局,兰州730010
相关基金：国家自然科学基金（30870586）; 973计划（2010CB83-4200）
相关项目：重离子束辐射治疗癌症的应用基础研究

关键词： NOX, 活性氧, 人前列腺癌细胞PC-3, X射线, NADPH oxidase, reactive oxygen species, human prostate cancer PC-3 cells, X-ray

中文摘要：

目的：研究NOX家族在X射线诱导人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞损伤中的作用,寻找放疗增敏的潜在靶点。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法检测0、1、2、4和12 Gy X射线照射后24、48和96 h PC-3细胞存活率;采用DCFH-DA法检测0、1和4 Gy X射线照射后15、30、60和120 min时PC-3细胞中ROS的生成量;采用Western blot方法检测0、1和4 Gy X射线照射后PC-3细胞中NOX1～NOX5 5个亚型蛋白的表达情况。结果：1、2、4和12 Gy X射线照射PC-3细胞后96 h,与未照射组比较,PC-3细胞的存活率明显下降（P〈0.05）。1和4 Gy X射线照射PC-3细胞60 min后,细胞内ROS水平最高,NOX抑制剂DPI及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理可以减少ROS的生成。1和4 Gy X射线照射后PC-3细胞中NOX1、NOX2和NOX5蛋白表达显著增加。结论：X射线诱导NOX1、NOX2和NOX5蛋白过表达,细胞内产生过量的ROS是X射线诱导PC-3细胞损伤的机制之一。

英文摘要：

OBJECTIVE：To study the role of NOX（NADPH oxidase） in X-ray-induced damage of human androgen-independent prostate cancer PC-3 cells damage,search for potential targets for radiation sensitization. METHODS：The viability of human androgen-independent prostate cancer PC-3 cells induced by 0,1,2,4 and 12 Gy of X rays after 24,48 and 96 h was detected by the MTT assay.The level of ROS after X-ray irradiation for 15,30,60 and 120 min,and the expression of NOX 1-5 protein in PC-3 cells induced by 0,1 and 4 Gy of X rays was analyzed by using DCFH-DA as a probe and by Western blot,respectively.RESULTS：Compared with nonirradiated, the viability of human prostate cancer PC-3 cells induced by 1,2,4 and 12 Gy of X rays was significantly decreased（P0.05）.The level of ROS reached a maximum at 60 min after 1 and 4 Gy of X-ray irradiation.NOX inhibitor DPI and antioxidant NAC pretreatment could reduce the generation of ROS.Western blotting showed the expressions of N0X1,NOX2 and NOX5 were increased after irradiation.CONCLUSION：X-ray-induced the homologs NOX1,NOX2 and NOX5 of the catalytic subunit gp91~（phox） of NADPH oxidase over-expression,resulting in excessive intracellular ROS which is a new mechanism of X-ray-induced damage of prostate cancer cells.

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