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鸡巨噬细胞HD11不同转染方法的比较分析
  • ISSN号:0529-5130
  • 期刊名称:《畜牧与兽医》
  • 时间:0
  • 分类:S858.31[农业科学—临床兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]扬州大学表观遗传学及表观基因组学研究所,江苏扬州225009, [2]扬州大学动物科学和技术学院,江苏扬州225009, [3]扬州大学医学院,江苏扬州225009
  • 相关基金:国家自然科学基金重大研究计划(91540117);国家自然科学基金面上项目(81372237);国家自然科学基金青年基金项目(31602032); 江苏省畜牧学优势学科项目
中文摘要:

以鸡巨噬细胞HD11作为研究对象,分别采用5种不同的脂质体试剂转染和电转方法将含有绿色荧光蛋白(GFP)的质粒转入HD11细胞中,然后通过比较并筛选出适合鸡巨噬细胞HD11的最佳转染方法。结果显示:Lipofectamine 2000 Reagent、Attractene Transfection Reagent和Trans IT-2020 Transfection Reagent几种常见的脂质体转染试剂并不适用于HD11细胞转染。而Coming Transfection Reagent、Lip2000 Transfection Reagent脂质体转染试剂和电转可用于HD11细胞转染;其中,Lip2000 Transfection Reagent转染试剂效果最好。在此基础上,通过进一步优化得出:当DNA(μg)和Lip2000(μL)的比例为1∶1.5时转染效率最高。本研究成功筛选出一种有效的鸡巨噬细胞HD11转染方法,为鸡巨噬细胞的转染及其相关研究提供了实验依据。

英文摘要:

In this study, the plasmid containing green fluorescent protein (GFP) was transfected into chicken macrophage cell line HD11 using five different liposome transfection reagents or electroporation method to optimize the transfection method for HD11 cell. The results showed that several liposome transfection reagents including lipofectamine 2000 Reagent, Attractene Transfection Reagent and TransIT - 2020 Transfection Reagent were not suitable for HD11 cell transfection. However, Coming Transfection Reagent, Lip2000 Transfection Rea- gent and electric transduction could be 'used for transfecting HD11 cells. The best transfection efficiency was observed in HD11 ceils when transiected with Lip2000 Transfection Reagent. Furthermore, the highest transfection efficiency for HD11 cells was obtained when the ratio of plasmid DNA (μg) to Lip2000 (μL) was 1 : h 5. Therefore, an efficient method for transfection of chicken macrophage HD11 cell line was successfully established and it provided the experimental basis for this cell line transfection and other related investigations.

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期刊信息
  • 《畜牧与兽医》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南京农业大学
  • 主编:石放雄
  • 地址:江苏省 南京市 卫岗1号南京农业大学内
  • 邮编:210095
  • 邮箱:muyizz@mnjau.edu.cn
  • 电话:025-84395701
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-5130
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1192/S
  • 邮发代号:28-42
  • 获奖情况:
  • 全国中文核心期刊,全国畜牧兽医期刊评比一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:17624