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枯草芽孢杆菌NJ-18的质粒消解及其在小麦根部的定殖
  • ISSN号:0578-1752
  • 期刊名称:《中国农业科学》
  • 时间:0
  • 分类:S436.421.1[农业科学—农业昆虫与害虫防治;农业科学—植物保护]
  • 作者机构:[1]南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室,南京210095
  • 相关基金:基金项目:国家“973”(2009CB118906,2012CB114000)、国家“863”(2012AA101502)、国家自然科学基金项目(30971891,31171880)、国家科技支撑计划项目(2012BAD19801)、农业部公益性(农业)科研专项(200903052,201103016)
中文摘要:

【目的】研究从土壤中分离出来的具有广谱抗菌活性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株NJ-18与作物互作关系,并观察外源导入绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的NJ-18菌株在小麦根部的定殖能力。【方法l首先使用十二烷基硫酸钠(SDS)消解NJ-18的质粒,然后采用化学法导入gfp分子标记,并采用激光共聚焦显微镜检测该标记菌株在小麦根部的定殖能力。[结果】获得了NJ-18的质粒消解菌株c136,并采用化学方法成功将外源基因导入野生型菌株NJ-18及其质粒消解菌株C136,C136的转化效率可达到3.42×10^5cfu/μg质粒DNA,是NJ-18转化效率的10倍左右。对比NJ-18与c136的生物活性发现,C136能够保持原有的抑菌活性;但是C136的生长曲线第一峰值出现的时间滞后12h,第一峰值被抑制了29.4%;NJ-18-GFP能够附着在病原菌菌体上,导致其菌丝呈现膨大、畸形等;接种7d后能够在小麦根部表皮和中柱稳定定殖。【结论】枯草芽孢杆菌NJ-18菌株的转化方法宜选用化学法;该菌株能够在小麦根部定殖。

英文摘要:

[Objective] Bacillus subtilis strain NJ-18, isolated from the soil of oilseed rape field, has a broad spectrum antibacterial activity and a great potential for biocontrol. In order to study the interaction between NJ-18 and plants, NJ-18 was marked with a green fluorescent protein (gfp) gene and its colonization ability on wheat roots was observed with a laser scanning confocal microscope. [ Method ] The plasmids of N J-18 were cured by sodium dodecyl sulfate (SDS) and gyp was transformed into the strain with a chemical method. Colonization ability of NJ-18 on wheat roots was observed with a laser scanning confocal microscope. [Result] By a chemical method, gfp was sucessfuUy transformed into wild strain NJ-18 and C136, a plasmid cured strain from N J-1 8. The transformation efficiency of C 136 could be up to 3.42 ×10^5cfu/μg of plasmid DNA and was about 10-fold of that of N J-18. Compared with N J-18, C 136 had the same antibacterial activity, but its growth was inhibited in a certain extent. N J-18 could attach on the pathogen microbial cells, resulting in mycelium enlargement and malformations. NJ-18 was able to colonize in the phloem and xylem of wheat roots on 7 days after inoculation. [Conclusion] The chemical transformation method is suitalbe for strain NJ-18. NJ-18 can colonize on wheat roots.

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期刊信息
  • 《中国农业科学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院 中国农学会
  • 主编:万建民
  • 地址:北京中关村南大街12号中国农业科学院图书馆楼4101-4103室
  • 邮编:100081
  • 邮箱:zgnykx@caas.cn
  • 电话:010-82109808 82106279
  • 国际标准刊号:ISSN:0578-1752
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1328/S
  • 邮发代号:2-138
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双高”期刊,第三届中国出版政府奖提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国食品科技文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:85620