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大白菜线粒体DNA有效、快速提取方法
  • ISSN号:1004-311X
  • 期刊名称:《生物技术》
  • 时间:0
  • 分类:S634.1[农业科学—蔬菜学;农业科学—园艺学]
  • 作者机构:[1]西北农林大学科技大学园艺学院,陕西杨凌712100
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(No.30270913)
中文摘要:

目的:建立一种有效,快捷的大白菜线粒体DNA(mtDNA)提取方法。方法:采用差速离心和蔗糖衬垫相结合的方法先从大白菜胞质雄性不育系及保持系叶片中分离出线粒体,然后用SDS-蛋白酶K裂角法提取mtDNA。结果:琼脂糖凝胶电泳表明,采用该方法提取的mtDNA片段大小的30-40kb之间,电泳条带清晰,无明显降解发生;以提取的mtDNA为模板进行RAPD反应,不育系和保持系均扩增出较多的条带,而且呈现出丰富的多态性,大小分布在500bp-3000bp之间,且条带清晰,没有脱尾现象。结论:该方法提取mtDNA,省时、省钱,对实验设备要求较低,而且分离出的mtDNA质量较高,能满足后续分子生物研究工作需要。

英文摘要:

Objectives:To study and establish an effective and quick method for mitochondrial DNA (mtDNA)extraction from Chinese cabbage. Methods: Based on differential centrifugation and sucrose shethod method, the mitnchondria was extracted from cytoplasmic male sterile lines and their maintainer lines of Chinese cabbage and the mtDNA was extracted sueeessfully by SDS - Proteinase K method. Results: Agrose gel electrophoresis showed the extracted mtDNA fragments ranged between 30 and 45kb in size and was not destroyed by nucleases. Clear polymorphic frag ments were obtained by RAPD - PCR with the templates of the extracted mtDNA and the polymorphic fragments ranged in size from 500 to 3000bp. Conclusion: Compared with other methods, this protocol costed less time and money and had higher efficiency and the extracted mtDNA with good quality can meet the need of the following researeh work.

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期刊信息
  • 《生物技术》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:黑龙江省科学院
  • 主办单位:黑龙江省科学院微生物研究所 黑龙江省微生物学会 黑龙江省生物工程学会
  • 主编:张介驰
  • 地址:哈尔滨市道里区兆麟街68号
  • 邮编:150010
  • 邮箱:swjszz@163.com
  • 电话:0451-84615121
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-311X
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1319/Q
  • 邮发代号:14-225
  • 获奖情况:
  • 中国生物学核心期刊,中国核心期刊(遴选)数据库...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13503