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基于蛋白酶活性控制的重组人β干扰素毕赤酵母表达体系优化
  • ISSN号:1001-8255
  • 期刊名称:《中国医药工业杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]江南大学医药学院,江苏无锡214122
  • 相关基金:国家“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09102-221)、国家自然基金(31000016);江苏省自然科学基金(企业博士创新项目BK2009518)、江苏省科技支撑计划(BE2009629)
中文摘要:

以毕赤酵母人β干扰素表达体系为研究对象,考察与蛋白酶活性相关的营养和环境因素对外源蛋白hIFNβ-HAS表达/降解的影响。结果表明,pH、谷氨酸和EDTA是显著影响hIFNβ-HAS表达的3个因素。通过响应面分析得到hIFNβ-HAS表达的最优条件为pH5.5、谷氨酸0.18%、EDTA12mmol/L,目的蛋白表达量为24.46mg/L。发酵终产物的电泳结果表明:条件优化后,h1FNβ-HSA降解带明显变淡,说明营养和环境因素的优化一定程度上抑制了蛋白酶的活性,由此增加了目的蛋白的积累。

英文摘要:

The effect of nutrition and environmental factors related to protease activity on the expression and degradation of exogenous protein (IFN β-HAS) was investigated in Pichia pastoris expression system. The results suggested that pH, glutamic acid and EDTA were three key factors significantly affected the expression of IFN β-HAS. Moreover, the optimal condition was determined as pH 5.5, glutamic acid 0.18% and EDTA 12 mmol/L by response surface analysis of three factors and three levels. The production of IFN β-HSA reached 24.46 mg/L. The electrophoresis results of the final fermentation product showed that the degradation of IFNβ-HSA reduced significantly and the production of target protein increased due to the activity of protease was inhibited after the optimization of nutrition and environmental factors.

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期刊信息
  • 《中国医药工业杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:上海医药工业研究院
  • 主办单位:上海医药工业研究院 中国化学制药工业协会
  • 主编:
  • 地址:上海市北京西路1320号
  • 邮编:200040
  • 邮箱:cjph@pharmadl.com
  • 电话:021-62793151
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-8255
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1243/R
  • 邮发代号:4-205
  • 获奖情况:
  • 1994年国家医药管理局信息成果一等奖,1996年上海市优秀科技期刊二等奖,1997年全国优秀科技期刊三等奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国国际药学文摘,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:20697