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藏羚羊肌红蛋白(MGB)基因编码区的克隆与分析
  • ISSN号:0250-3263
  • 期刊名称:动物学杂志
  • 时间:0
  • 页码:70-75
  • 语言:中文
  • 分类:Q781[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]青海大学医学院高原医学研究中心,西宁810001
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30660052),青海省重点科技攻关项目(No.2003-N-120);致谢 承蒙军事医学科学院基础医学研究所范明研究员、范文红博士、王晓文博士、吴燕老师、吴海涛硕士、马鑫硕士等在实验过程中提供帮助,谨此致谢!
  • 相关项目:藏羚羊肌红蛋白基因克隆及其耐缺氧作用机制的研究
中文摘要:

为了探讨藏羚羊低氧适应的分子生物学机制,从藏羚羊(Pantholops hodgsonii)骨骼肌组织中提取总RNA,通过逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)技术扩增出MGB基因编码区cDNA片段,并与pGEM-T Easy载体连接构建重组质粒,转化DH5α菌。扩增培养后鉴定阳性质粒并进行序列测定,结果与NCBI数据库进行比较。结果显示,MGB基因编码区由465bp组成,编码154个氨基酸。其序列与绵羊、牛、猪、人、小鼠、大鼠的同源性分别是98%、97%、90%、86%、82%、81%。推测出的氨基酸序列与绵羊、牛有98%同源性,而与猪、人、小鼠及大鼠分别有89%、85%、80%、79%的同源性。与NCBI数据库登录的绵羊的MGB cDNA序列比较发现,藏羚羊MGB基因的21位和78位密码子分别发生了突变(GGT→GAT和GAA→AAG),其对应的氨基酸分别由甘氨酸变为天冬氨酸及谷氨酸变为赖氨酸。至此,成功克隆出藏羚羊MGB基因编码区,为进一步揭示藏羚羊低氧适应的分子机制打下基础。

英文摘要:

In order to explore the molecular mechanism of Tibetan Antelope (Pantholops hodgsonii ) adaptation to chronic hypoxia, total RNA was isolated from Tibetan Antelope skelecton muscle, and the coding region of MGB gene was amplified by RT-PCR technique using a general PCR primer based on previously reported cDNA sequence in sheep, cattle, pig, human, mouse and rat. The product of PCR was directly inserted into the pGEM-T Easy vector and sequenced. DNA sequences were compared with Genbank data by Blast. The results showed that MGB gene coding region is composed of 465 bp and codes 154 amino acids. DNA sequencing proved that Tibetan Antelope MGB sequence was highly homologous with that of sheep (98%), cattle (97%), pig (90%), human ( 86% ), mouse (82%) and rat (81% ) .The deduced amino acid sequence showed 98% ,98% ,89% ,85% ,80% and 79% identity when compared with that of the sheep, cattle, pig, human, mouse and rat. When comparing the MGB sequence of P. hodgsonii with that of sheep, two variations could be observed at the codon of 21 (GGT→ GAT) and 78 (GAA→AAG), which leads to two variations on the corresponding amino acid: Gly→ Asp and Glu→Lys, respectively. In summary, wesuccessfully cloned the MGB gene coding region from Tibetan Antelope, which is important for understanding the molecular mechanism of Tibetan Antelope Adaptation to chronic hypoxia.

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期刊信息
  • 《动物学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国动物学会 中国科学院动物研究所
  • 主编:宋延龄
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院5号
  • 邮编:100101
  • 邮箱:journal@ioz.ac.cn
  • 电话:010-64807162
  • 国际标准刊号:ISSN:0250-3263
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1830/Q
  • 邮发代号:2-422
  • 获奖情况:
  • 全国核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:13064