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半导体量子点-Smad4单克隆抗体荧光探针的制备及免疫特异识别能力的检测
  • ISSN号:1002-0098
  • 期刊名称:《中华口腔医学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R532.302[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学] R446.112[医药卫生—诊断学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科,400016
  • 相关基金:国家自然科学基金(30470893)
中文摘要:

目的制备半导体量子点(semiconductor quantumdots,SQD)单克隆抗体荧光探针-Smad4(SQD-Smad4),并检测其光学性质和免疫特异性识别能力,为视踪检测活细胞内蛋白质等生物分子提供实验手段。方法用化学偶联法制备水溶性SQD-Smad4探针,测定其荧光比值、光稳定性、吸收光谱和发射光谱;采用SP免疫组化法和SQD-Smad4直接免疫荧光成像法观察比较Smad4在大鼠牙乳头细胞内的分布。结果在紫外线持续照射12h前后605SQD和605SQD-Smad4的相对荧光比值分别为250、254和240、242。SQD与Smad4单抗通过共价结合形成稳定的SQD.Smad4,其对大鼠牙乳头细胞内Smad4分子在TGF-β1刺激牙乳头细胞24h后发生核移位,说明具有特异性的识别能力;SQD-Smad4仍具有SQD所具有的激发光谱宽、发射光谱窄、荧光度强、光化学稳定性好等光学特征。结论SQD和单抗共价结合形成分子探针后仍具有特异免疫识别能力和独特的光学性质,为SQD原位、长时间视踪检测活细胞内生物分子运动提供了实验基础。

英文摘要:

Objective To prepare semiconductor quantum dots (SQD)-Smad4 monoclonal antibodyfluorescent probes and to detect the optical qualities and the ability of specific recognition of the probes. Methods SQD were chemically modified with Smad4 monoclonal antibody proteins to prepare water soluble probes, and the fluorescence intensity, photostability, absorption spectra and emission spectra of the probes were studied. The location of Smad4 in rat dental papillae cells (RDPC) was examined by SP anti- Smad4 immunocytochemical method and SQD-Smad4 direct immunofluorescent imaging. Results SQD and monoclonal antibody covalently bonded to form the fluorescent probes which could specifically recognize Smad4 in RDPC. These fluorescent probes still had properties, including broad absorption band, narrow emission band, high fluorescence intensity and photostability. Conclusions SQD and monoclonal antibody could covalently bond to form the fluorescent probes with distinct optics character and ability of specific recognization,which provides the scientific evidence that SQD trace the molecular movement in living cells in long-term, in situ and in real time.

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期刊信息
  • 《中华口腔医学杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中华医学会
  • 主编:
  • 地址:北京市东四西大街42号
  • 邮编:100710
  • 邮箱:cjst1953@cma.org.cn
  • 电话:010-85158254/5/6/7
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-0098
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2144/R
  • 邮发代号:2-64
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊评比二等奖(1996),第二届全国优秀科技期刊评比三等奖(1996),入选“中国期刊方阵(双效期刊)”(2001)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:24337