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hTERT基因转染激活人毛乳头细胞端粒酶的实验研究
  • ISSN号:1000-4963
  • 期刊名称:《临床皮肤科杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R322.995[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学] Q55[生物学—生物化学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学大坪医院野战外科研究所皮肤科,重庆400042
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30570972)
中文摘要:

目的:明确外源性人端粒酶反转录酶(hTERT)基因转染能否激活体外培养人毛乳头细胞(DPC)的端粒酶。方法:采用脂质体转染法,将空载体质粒pIRES2-EGFP和含有hTERT基因的质粒pIRES2-EGFP—hTERT分别导入体外培养的正常人DPC,经G418筛选得到阳性克隆,连续传代培养。应用反转录(RT)-PCR法检测hTERT mRNA的表达,端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测细胞端粒酶活性。结果:未转染DPC和空载体转染细胞(DPC-EGFP)无hTERT mRNA表达,端粒酶活性为阴性;而外源性hTERT基因转染细胞(DPC-hTERT)稳定表达hTERT mRNA,同时端粒酶活性转为阳性。结论:外源性hTERT基因转染能够激活体外培养人DPC的端粒酶,为建立永生化细胞系奠定基础。

英文摘要:

Objective: To explicate whether the telomerase can be activated by human telomerase reverse transcriptase (hTERT) in human dermal papilla cells (DPC). Methods: The plasmid plRES2-EGFP and plasmid plRES2-EGFP-hTERT encoding hTERT were transfected into cultured normal human DPC, then the positive cells were selected with G418. After the positive cells were expanded in culture, the expression of hTERT mRNA was detected by RT-PCR, and the telomerase activity was detected by TRAP-ELISA. Results: The hTERT wasn't expressed at mRNA level and the telomerase activity was negative in untransfected DPC and vacant vector transfected cells(DPC-EGFP). The hTERT was expressed at mRNA level and meanwhile the telomerase activity was positive in plRES2-EGFP-hTERT transfected cells(DPC-hTERT). Conclusion: Telomerase can be activated by hTERT in human DPC. This is the first step to establish immortalized human DPC line.

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期刊信息
  • 《临床皮肤科杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:江苏省卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
  • 主编:范卫新
  • 地址:南京市广州路300号
  • 邮编:210029
  • 邮箱:linpizazhi@163.com
  • 电话:025-83729951
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-4963
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1202/R
  • 邮发代号:28-7
  • 获奖情况:
  • 中国科技论文统计源期刊,全国优秀科技期刊,皮肤科学中文核心期刊,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:23499