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兔抗鼠CaV1.2羧基末端多克隆抗体的制备和鉴定
  • ISSN号:1005-2593
  • 期刊名称:Chinese Journal of Conservative Dentistry
  • 时间:2011
  • 页码:229-232+213
  • 分类:R780.2[医药卫生—口腔医学;医药卫生—临床医学]
  • 作者机构:[1]同济大学附属口腔医院,上海200072, [2]上海交通大学附属口腔医院,上海200011
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(81070825); 上海市科委医学引导项目(10411964600)
  • 相关项目:L型钙离子通道羧基末端对成牙本质细胞多基因转录调控作用
中文摘要:

目的:制备高效价的兔抗鼠钙通道CaV1.2羧基末端多克隆抗血清。方法:人工合成鼠L型钙离子通道CaV1.2羧基末端短肽;用该短肽与马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(Keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联免疫兔获得抗血清;利用饱和硫酸铵盐析和亲和层析法获得纯化后抗血清;酶联免疫吸附法实验测定抗体效价;斑点杂交实验测定抗血清特异性。结果:经免疫得到兔抗鼠L型钙离子通道CaV1.2羧基末端多克隆抗血清;ELISA和斑点杂交实验证实兔抗鼠CaV1.2羧基末端多克隆抗体可以特异性识别CaV1.2羧基末端多肽。结论:本实验成功制备纯化抗CaV1.2羧基末端多克隆抗体并且可以用于后续CaV1.2羧基末端水解片段的功能研究。

英文摘要:

AIM:To obtain rabbit anti-rat C terminus of calcium channel CaV1.2 polyclonal antiserum. MEHODS:The short peptides from C terminus of rat CaV1.2 were synthesized,which were used to cross-link with Keyhole limpet hemocyanin,KLH.New Zealand white rabbits were immunized by synthesized peptides-KLH to obtain polyclonal antiserum.The antibody was purified by ammonium sulfate and affinity chromatography and characterized by ELISA and dot blot.RESULTS:Antiserum against C terminus of rat CaV1.2 was obtained in immunized rabbits. ELISA and dot blot identified that the antiserum could recognize the peptides of C terminus of rat CaV1.2.CONCLUSION: The polyclonal antiserum has been generated successfully,which can be used to explore the potential function of the C terminus of L-type calcium channel.

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期刊信息
  • 《牙体牙髓牙周病学杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:第四军医大学
  • 主办单位:第四军医大学口腔医学院
  • 主编:唐荣银
  • 地址:陕西省西安市长乐西路145号
  • 邮编:710032
  • 邮箱:kqytbk@fmmu.edu.cn
  • 电话:029-84776082
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-2593
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1254/R
  • 邮发代号:52-128
  • 获奖情况:
  • 1996年第二次全军医学期刊质量评比中获优秀编辑奖,1999年获陕西省优秀科技期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版)
  • 被引量:13034