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全内反射荧光显微技术实时观察人偏肺病毒感染
  • ISSN号:1000-8861
  • 期刊名称:《免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R392.12[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属儿童医院 儿童发育疾病研究教育部重点实验室 儿科学重庆市重点实验室,400014
  • 相关基金:国家自然科学基金(30800972); 重庆市自然科学基金(2012BB2145)
中文摘要:

目的利用显微成像技术拍摄并分析人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)的入胞过程,以探讨hMPV的感染免疫方式。方法使用全内反射荧光技术(total internal reflection fluorescence,TIRF)连续拍摄带有绿色荧光蛋白的病毒影像,并逐帧分析病毒的感染过程。结果感染开始后邻近培养介质的细胞膜上hMPV数量缓慢增多并在15~20 min时大量进入细胞。黏附于细胞上的病毒大部分做小振幅的无规律运动,偶见快速移动。感染12 h后hMPV在细胞膜阴影处、两细胞交界面大量聚集。结论本研究探讨了使用TIRF实时观察病毒入胞的可行性,结果表明TIRF技术能够连续观察病毒的运动规律和分布状况,为进一步揭示hMPV的感染免疫机制以及疫苗研制奠定了实验基础。

英文摘要:

Human metapneumovirus (hMPV) is there is no morphology report about the infection. In infection, total internal reflection fluorescence (TIRr) a leading cause of respiratory infection in children. However, this study, with an aim of investigating early events of hMPV microscopy was used to observe GFP-hMPV contiguously and analyze virus characterization in every frame. The results showed that the number of hMPV particles was increased slowly at the beginning of infection and that viruses entered cells at 15-20 min post infection. When hMPV cohered to cell membrane, the movements of most individual viruses were slow and irregular and other viruses moved rapidly and bidirectionally. At 12 hour post infection, images showed that GFP-hMPV was accumulated along the specialized cell membrane sites and adherent surfaces of cells. The results suggested that TIRF provides a direct and effective way to recognize distribution and motion pattern of viruses on plasma membrane. This methodology will offer a solid foundation for further studies on pathogenesis of hMPV and development of attenuated vaccines.

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期刊信息
  • 《免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学 中国免疫学会
  • 主编:吴玉章
  • 地址:重庆市沙坪坝高滩岩
  • 邮编:400038
  • 邮箱:richard@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023-68752237
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8861
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1332/R
  • 邮发代号:78-32
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊三等奖,全军优秀医学期刊奖,重庆市优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:13273