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肺癌细胞中NF-κB2基因表达及启动子区域甲基化状态分析
  • ISSN号:1000-8861
  • 期刊名称:免疫学杂志
  • 时间:2014
  • 页码:432-435
  • 分类:R734.2[医药卫生—肿瘤;医药卫生—临床医学] R394.2[医药卫生—医学遗传学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学大坪医院野战外科研究所检验科,重庆400042, [2]第三军医大学大坪医院第七研究室,重庆400042
  • 相关基金:国家自然科学基金(21107140);重庆市自然科学基金(CSTC2011BB5041)
  • 相关项目:低剂量砷去甲基化作用上调肺上皮细胞NF-kB2表达的分子机制研究
中文摘要:

目的研究肺癌细胞和人正常支气管细胞(human bronchial epithelial cell,HBE)中NF-kB2的表达情况及其启动子区CpG岛的甲基化状态。方法采用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)方法检测肺癌细胞和正常支气管细胞NF-kB2基因mRNA的表达情况;采用Westernblot技术检测NF-kB2前体蛋白p100的表达情况;采用重亚硫酸盐测序(Bisulfite Sequencing PCR,BSP)技术检测NF-kB2启动子区CpG岛的甲基化状态。结果肺腺癌细胞株A549、肺鳞癌细胞株SK-MES-1和小细胞肺癌细胞株NCI-H446的NY-KB2mRNA的表达分别是HBE细胞株的6.42±0.91倍(P〈0.5,t=5.828)、2.78±0.52倍(P〈0.05,t=3.219)、2.79±0.33倍(P〈0.05,t=4.611);3种肺癌细胞中p100蛋白较HBE细胞均上调表达;4种细胞株中所扩增片段的CpG位点均呈非甲基化状态。结论肺癌细胞及HBE细胞中NF-kB2启动子区域的CpG位点处于非甲基化状态.说明NF-kB2基因表达情况与甲基化状态无直接关系,其启动子区的甲基化修饰未直接参与该基因的表达调控,可能存在其他相关的调控机制,有待进一步的探索。

英文摘要:

To investigate the association between expression and methylation status of NF-kB2, we assessed the expression of NF-kB2 and also analyzed its methylation status in three kinds of lung cancer cell lines (A549, SK-MES-1, NCI-H446 ) and HBE cell line. Quantitative real-time PCR and Western blot were used to detect the expression of NF-kB2. In the same time, Bisulfite-sequencing PCR (BSP) was performed to detect the methylation status in the promoter region of NF-kB2. As a consequence, we found that both mRNA and protein expression of NF-kB2 in 3 lung cancer cell lines increased compared with HBE cell line. However, no methylation site of NF- kB2 was found in all the cell lines. Taken these findings together, we may conclude that overexpression of NF-kB2 in lung cancer cell lines is not directly regulated by its promoter methylation. Thus other related regulation mechanism of NF-kB2 overexpression in lung cancer cells should be taken into account further.

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期刊信息
  • 《免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:第三军医大学
  • 主办单位:第三军医大学 中国免疫学会
  • 主编:吴玉章
  • 地址:重庆市沙坪坝高滩岩
  • 邮编:400038
  • 邮箱:richard@mail.tmmu.com.cn
  • 电话:023-68752237
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-8861
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1332/R
  • 邮发代号:78-32
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊三等奖,全军优秀医学期刊奖,重庆市优秀期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:13273