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三七病程相关蛋白PR10-2基因的克隆、表达及功能初步分析
  • ISSN号:1001-5302
  • 期刊名称:《中国中药杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R392[医药卫生—免疫学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]昆明理工大学生命科学与技术学院,云南昆明650500, [2]云南省三七资源可持续利用重点实验室,云南昆明650500
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31560351,31260297)
中文摘要:

在转录组测序的基础上,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从三七主根中分离到三七病程相关蛋白10(pathogensis related protein 10,PR10)基因,命名为PnPR10-2,测序结果表明该序列长465 bp,编码154个氨基酸。氨基酸序列同源性及系统发育树分析发现,PnPR10-2与人参的PR10-2蛋白同源性最高,具有典型的病程相关蛋白Bet v I保守结构域。构建了重组载体pET32a(+)-PnPR10-2,在宿主菌Escherichia coli BL21中诱导表达融合蛋白,优化诱导条件,PnPR10-2融合蛋白在E.coli BL21中以可溶性和包涵体蛋白2种形式大量表达。纯化上清中的重组蛋白,运用纸片法分析纯化重组蛋白的体外抑菌活性,其对三七根腐病病菌腐皮镰刀菌Fusarium solani和坏损柱孢菌Cylindrocarpon destructans具有一定的抑制作用,猜测该基因可能参与了三七抗根腐病的防御反应。

英文摘要:

Base on the transcriptome analysis and RT-PCR techniques,a pathogenesis-related protein 10 gene was isolated from Panax notoginseng root and named as PnPR10-2. Bioinformatics and phylogenetic trees analysis revealed that open reading frame( ORF)of PnPR10-2 was 465 bp in length,encoding 154 amino acids,containing one typical conserved domain of pathogenesis related protein Bet v I family,and showed high similarity with that from P. ginseng. The recombinant expressed plasmid pET32a( +)-PnPR10-2 was expressed in Escherichia coli BL21. The expression conditions were optimized and it could be expressed well in soluble and inclusion body protein. Purified PnPR10-2 recombinant protein from the supernatant of cells was used to analysis the pathogen resistance activity by paper method. The purified recombinant protein could inhibit typical root rot disease pathogen( Fusarium solani and Cylindrocarpon destructans) growth evidently,we conjecture that PnPR10-2 may participated in defense response of P. notoginseng resistance to root rot disease pathogen.

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期刊信息
  • 《中国中药杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国药学会
  • 主编:肖培根
  • 地址:北京市东直门内南小街16号
  • 邮编:100700
  • 邮箱:cjcmm2006@126.com
  • 电话:010-64087589
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-5302
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2272/R
  • 邮发代号:2-45
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国国际药学文摘,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物医学检索系统,美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:94720