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丙型肝炎病毒(HCV)非结构区NS3-5B蛋白的真核表达载体构建及其在BHK-21细胞中的表达
  • ISSN号:1671-1815
  • 期刊名称:科学技术与工程
  • 时间:2013.12.28
  • 页码:10794-10797+10805
  • 分类:R373.21[医药卫生—病原生物学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第四军医大学基础医学部微生物学与病原生物学教研室,西安710032
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(81171637,31172166)资助
  • 相关项目:建立一种能实时直观评价丙型肝炎病毒抑制剂作用效果的新型实验动物模型
中文摘要:

通过PCR方法扩增出HCVNS3—5b全长基因序列,克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP中,构建重组质粒p1RES2-EG,FP—NS3—5b。利用脂质体将该质粒转染至BHK-21细胞,通过荧光成像和WesternBlot检测NS3—5b基因的表达。结果显示成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP—NS3—5b,并且NS3/4A蛋白和NS5B蛋白得到特异性表达,为下一步建立HCVRdRp活性的细胞评价系统和动物模型评价系统奠定了实验和理论基础。

英文摘要:

To construct the recombinant plasmid pIRES2-EGFP-NS3-SB, HCV NS3-Sb gene was amplified by the polymerase chain reaction (PCR) and cloned into the eukaryotic expression plasmid plRES2-EGFP. Then the recombinant plasmid was transfected into BHK-21 cells by Lipofectamine 2000 and the expression of target genes were identified by fluorescence imaging and western blot analysis. The results showed that the plasmid pIRES2-EG- FP-NS3-5b was successfully constructed and NS3/4A and NSSB proteins were specifically expressed in the eukary- otic cells. It provides the basis for the establishment of a cell-based HCV RdRp evaluation system and animal mod- els development.

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期刊信息
  • 《科学技术与工程》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国技术经济学会
  • 主编:明廷华
  • 地址:北京市学院南路86号
  • 邮编:100081
  • 邮箱:ste@periodicals.net.cn
  • 电话:010-62118920
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-1815
  • 国内统一刊号:ISSN:11-4688/T
  • 邮发代号:2-734
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:29478