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水稻原生质体制备条件的优化及其细胞壁变化的快速检测
  • ISSN号:1004-1389
  • 期刊名称:西北农业学报
  • 时间:2014.9
  • 页码:56-62
  • 分类:Q24[生物学—细胞生物学] S51[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]云南大学,昆明650091, [2]云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所,昆明650223, [3]云南省农业生物技术重点实验室,昆明650223, [4]云南昆明农业部西南作物资源与新种质创制重点实验室,昆明650223
  • 相关基金:国家自然科学基金(NFSC31160067); 云南省科技计划项目省应用基础研究计划(2012FA005); 国家公益性行业科研专项(201003021); 云南青年项目(201301YC00011)
  • 相关项目:云南疣粒野生稻免疫白叶枯病的抗性基因分析及定位研究
中文摘要:

以疣粒野生稻和栽培稻02428的成熟种子为材料,对愈伤组织的诱导和继代、胚性悬浮细胞系建立、原生质体制备、再生细胞团分化及植株再生进行研究。结果表明:(1)水稻愈伤组织诱导的最佳2,4-D浓度为0.014mmol/L;(2)胚性悬浮细胞系建立的最佳条件为AA悬浮培养基+0.009mmol/L 2,4-D,每25mL液体培养基加入0.4g愈伤组织的初始接种量,7d的继代周期;(3)原生质体制备的最佳条件为20g/L纤维素酶+1g/L果胶酶,酶解5h,800r/min离心5min;(4)用荧光增白剂(VBL)细胞壁染色液可以快速、准确的检测原生质体制备及培养过程中细胞壁的变化情况。

英文摘要:

The mature seeds of O. meyeriana and O. Sativa 02428 were used as the materials to study the callus induction and subculture, establishment of embryogenic suspension cells, preparation of protoplasts, differentiation of regeneration of cells and regeneration of plant. The results show that (1) The appropriate concentration of 2,4-D for callus induction is 0. 014 mmol/L. (2) The appropri- ate condition of establishing embryonic suspension cell line is AA suspension medium+0. 009 mmol/L 2,4-D,0.4 g per 25 mL liquid medium of initial inoculation amount and 7 d of subculture cycle. (3) The appropriate condition of protoplast preparation is 20 g/L Celluase Onozuka RS +1 g/L Pectol- yase Y-23 pectinase, 5 h of enzymatic hydrolysis time, 800 r/min of purification speed for 5 min. (4) The method of fluorescent whitening agent (VBL) can be used for rapid and accurate deteetion of cell wall changes in the process of plant protoplast preparation and culture.

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期刊信息
  • 《西北农业学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:西北农林科技大学 甘肃、宁夏、青海、新疆农(林)业科学院 青海、新疆畜牧(兽医)科学院及新疆农垦科学院
  • 主编:廖允成
  • 地址:陕西杨凌邰城路3号西北农林科技大学西林校区大铁10号信箱
  • 邮编:712100
  • 邮箱:xbnx@chinajournal.net.cn
  • 电话:029-87082760 87082010
  • 国际标准刊号:ISSN:1004-1389
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1220/S
  • 邮发代号:52-111
  • 获奖情况:
  • 教育部科技司颁发的"优秀科技期刊二等奖"等
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:27312