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β_2糖蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备与鉴定
  • ISSN号:1000-484X
  • 期刊名称:《中国免疫学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R593.2[医药卫生—临床医学;医药卫生—内科学]
  • 作者机构:[1]江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013, [2]江苏大学附属人民医院儿科,江苏镇江212002
  • 相关基金:国家自然科学基金(30971301); 江苏大学博士创新基金(09A079)
中文摘要:

目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达,用免疫荧光染色法及western blot观察THP-1细胞表达IL-6、IL-8、TNF-α蛋白的情况。荧光定量PCR及western blot观察Toll样受体4(TLR4)途径抑制物(TAK-242)干预抗β2GPI/β2GPI复合物对THP-1细胞的刺激作用。结果抗β2GPI/β2GPI复合物(100μg/mL)刺激THP-1细胞不同时间,可使细胞表达IL-6、IL-8及TNF-αmRNA水平逐渐上升,于刺激2 h时IL-6、IL-8及TNF-α达到峰值(P〈0.01),免疫荧光染色及western blot证实细胞表达IL-6、IL-8及TNF-α蛋白水平也明显增加。TAK-242(5μmol/L)可显著抑制抗β2GPI/β2GPI复合物诱导的细胞IL-6、IL-8及TNF-α表达。结论抗β2GPI/β2GPI复合物通过TLR4途径,激活THP-1细胞表达炎性细胞因子IL-6、IL-8及TNF-α,参与抗磷脂综合征的病理机制。

英文摘要:

Objective To explore the possible mechanism of the anti-β2GPI/β2GPI complex stimulating monocyte cell line THP-1 to express inflammatory cytokines IL-6,IL-8 and TNF-α.Methods The expressions of IL-6,IL-8 and TNF-α mRNA in THP-1 cells following stimulating by anti-β2GPI/β2GPI complex at different points in time(0.5,1,1.5,2 and 6 h,respectively) were determined with real-time PCR,and their protein levels were measured with immunofluorescence and Western blot.The interference of inhibitor of TLR4 signal transduction pathway(TAK-242) for the effects of anti-β2GPI/β2GPI complex on THP-1 cells were investigated using real-time PCR and Western blot assays.Results The expression levels of IL-6,IL-8 and TNF-α mRNA in THP-1 cells stimulated with 100 μg/mL of anti-β2GPI/β2GPI complex were increased with the time of treatmenttime,and reached peak values at 2 hours after the stimulation(P〈0.01).The protein levels of IL-6,IL-8 and TNF-α were also significantly increased as demonstrated with immunofluorescence and Western blot.However,the expressions of IL-6,IL-8 and TNF-α mRNA in THP-1 cells induced by anti-β2GPI/β2GPI complex were inhibited obviously by 5 μmol/L of TAK-242.Conclusion Anti-β2GPI/β2GPI complex may stimulate THP-1 cells to express inflammatory cytokines IL-6,IL-8 and TNF-α via TLR4 signal transduction pathway,which involves the pathogenesis of antiphospholipid syndrome.

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期刊信息
  • 《中国免疫学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国免疫学会 吉林省医学期刊社
  • 主编:田志刚
  • 地址:长春市建政路971号
  • 邮编:130061
  • 邮箱:zhmizazh@126.com
  • 电话:0431-88925027
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-484X
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1126/R
  • 邮发代号:12-89
  • 获奖情况:
  • 中国自然科学核心期刊,中国期刊方阵“双效”期刊,2007年获吉林省新闻出版局期刊精品奖,2006年获中国科协精品期刊资助项目,2004年获首届北方八省优秀期刊奖,2003年中国免疫学杂志荣获第二届国家期刊奖(百种...,2001年中国免疫学杂志成为首批进入"中国期刊方阵"...,获1994年吉林省十佳期刊提名奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:20795