传统的单光子激发FRET模式下,当用紫外光或可见光激发能量供体时,常常会受到生物分子自身荧光和散射光的干扰。而且,在供体的有效激发波长下常常会造成对受体的直接激发。所以,目前FRET方法的发展,迫切需要选择合适的能量供.受体对。近些年来,双光子激发在生物应用方面引起了人们广泛地关注。双光子激发是指某些物质在强光激发下,能同时直接吸收两个光子跃迁到高能态的现象。