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鸡SIgA重链单克隆抗体的制备及新城疫病毒和禽流感病毒特异黏膜SIgA检测方法的建立
  • ISSN号:1008-0589
  • 期刊名称:《中国预防兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001, [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001
  • 相关基金:国家攻关项目(2004BA519A19、2005BA711A10);国家973项目(2005CB523200)
中文摘要:

为建立快速检测禽类黏膜组织中SIgA含量的方法,本研究原核重组表达鸡SIgA重链片段蛋白,纯化后免疫BALB/c鼠。以鸡胆汁中分离纯化的SIgA作为检测抗原,常规单克隆技术筛选出l株能够稳定分泌抗鸡SIgA单克隆抗体(MAb)的IgG2a、K型MAb。经ELISA和western blot分析,所获得的l株MAb亲和力高、特异性强;采用生物素标记纯化MAb腹水IgG为检测二抗,以禽流感一新城疫重组二联活载体疫苗免疫SPF鸡为模型,初步建立了新城疫病毒和H5亚型禽流感病毒特异的黏膜SIgA间接ELISA检测方法。本研究为开展特异性家禽黏膜免疫机制的研究提供了重要技术手段。

英文摘要:

To establish the method for detection of specific mucosal SlgA, BALB/c mice was immunized with puriticdrecombinant chicken partial SIgA heavy protein expressed in E. coli. A hybridoma cell line which steadily secreted monoclonalantibody (MAb) against chicken SIgA was prepared by fusion the mouse spleen cells with SP2/0 cells and screened by H.ISA coating with SIgA from chicken bile. Isotope of the MAb was lgG2a, K type. ELISA and western blot showed the MAb was highaffinity and specificity. An indirect ELISA method based on biotin-labeled MAb for the detection of Newcastle disease virus (NDV) and H5 avian influenza virus (H5 AIV) specific mueosal SIgA was established, and the method was successfully used forthe detection of NDV and H5 AIV specific SIgA in salivary of chickens immunized with recombinant NDV live vaccine. Our study provided technological evidence for mucosal immunity mechanism in poultry.

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期刊信息
  • 《中国预防兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
  • 主编:步志高
  • 地址:哈尔滨市香坊区哈平路678号
  • 邮编:150001
  • 邮箱:zgyfsyxbhvri@163.com
  • 电话:0451-51051811 51051812
  • 国际标准刊号:ISSN:1008-0589
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1417/S
  • 邮发代号:14-70
  • 获奖情况:
  • 全国农业优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12844