中文摘要：

目的采用let-7a模拟物对CD133+Huh7肝癌干细胞进行基因治疗,观察其对let-7a含量和对增殖转移能力的影响,并对其分子生物学机制进行初步探讨。方法流式分选获得CD133+Huh7肝癌干细胞,分为let-7a组、阴性对照(NC-mi RNA)组、空白对照组(control)组。采用RT-PCR法比较各组细胞let-7a的含量,平板克隆形成实验检测3组细胞的增殖能力,采用Transwell法检测3组细胞转移能力,荧光素酶报告基因检测3组细胞Wnt/β-catenin信号通路的活性。实验数据3组比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验。结果流式分选前后Huh7细胞CDl33阳性率分别为(1.03±0.16)﹪和(95.73±1.03)﹪,差异具有统计学意义(t=22.90,P<0.05)。let-7a组细胞中let-7a的表达量为对照组的(2 212±29)倍,差异具有统计学意义(t=29.50,P<0.05)。let-7a组细胞有效细胞克隆形成数量为(4.6±1.8)个/孔,明显低于对照组的(45.1±7.0)个/孔,差异具有统计学意义(t=-15.64,P<0.05)。let-7a组transwell过膜细胞数量37.41±8.69明显少于对照组的505.90±10.24,差异具有统计学意义(t=-24.13,P<0.05)。let-7a组Wnt/β-catenin信号通路的转录活性较对照组相比明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论micro RNA let-7a模拟物可以通过下调CD133+Huh7肝癌干细胞内Wnt/β-catenin信号通路的转录活性实现对肝癌干细胞增殖和转移功能的靶向抑制。