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鉴定血管加压素受体(V1aR)在小鼠肝脏枯否细胞和巨噬细胞中的表达
  • ISSN号:1674-568X
  • 期刊名称:《基因组学与应用生物学》
  • 时间:0
  • 分类:Q26[生物学—细胞生物学]
  • 作者机构:[1]亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,动物繁殖研究所,广西大学,南宁530004, [2]蛋白质组学国家重点实验室,北京蛋白质组研究中心,军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京102206
  • 相关基金:基金项目:本研究由国家重点基础研究发展计划(973计划2011CB910601,2011CB910700,2010CB912700和2011CB5053-04)和国家自然科学基金(81123001,30972909,81000192,81001470,81170399和81010064)共同资助
中文摘要:

为了研究V1aR在肝脏枯否细胞和巨噬细胞RAW264.7中的表达,为今后研究V1aR表达与巨噬细胞功能间的关系奠定基础,本研究首先使用胶原酶灌注法和磁珠分选法(MACS)分离纯化小鼠肝脏枯否细胞;然后分别使用普通显微镜、透射电镜和流式细胞仪对分离纯化后枯否细胞的纯度与功能进行评估;最后使用反转录多聚酶链式反应(RT—PCR)、Westernblot和免疫荧光检测V1aR在肝脏枯否细胞和巨噬细胞RAW264.7中的表达。普通显微镜和透射电镜结果表明本研究分离纯化后的柘否细胞具有巨噬样细胞的形态特征和吞噬活性;且流式细胞仪结果表明本研究分离纯化的枯否细胞的纯度可以达到98%以上。RT—PCR和Westemblot结果表明在mRNA和蛋白质水平均能检测到V1aR在枯否细胞和巨噬细胞RAW264.7中的表达。同时免疫荧光实验进一步验证了V1aR在巨噬细胞RAW264.7中的表达。总之,本研究首次鉴定到了血管加压素受体V1aR在巨噬样细胞中的表达。

英文摘要:

In ordrer to identify the expression ofvasopressin V1 a receptor (VlaR) in mouse liver Kupffer cells and mouse macrophages RAW264.7, which will facilitate the study of the relationship between the expression and function of VlaR in macrophages, follow methods were used in this study. Firstly, two-step collagenase perfusion and magnetic bead sorting (MACS) methods were used for isolation and purification of mouse Kuppfer cells. Secondly, general microscope, transmission electron microscopy, and flow cytometry were used to evaluate the purity and function of isolated Kupffer cells. Finally, reverse transcription-polymerase chain (RT-PCR), Western blot, and immunofluorescence were used to detect the expression of V1 aR in Kupffer cells and macrophages RAW264.7. The results of general microscope and transmission electron microscopy showed that the isolated Kupffer cells have macrophage-like morphology and phagocytic function. The flow cytometer results showed that the purity of isolated Kupffer ceils in this study is higher than 98%. The expression of VlaR at mRNA and protein levels in Kupffer cells and RAW264.7 were detected using RT-PCR and Western blot, respectively. We also further confirmed the expression of VlaR in macrophages using immunofluorescence. In summary, the expression of VlaR was found in macrophage-like cells.

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期刊信息
  • 《基因组学与应用生物学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:广西大学
  • 主办单位:广西大学
  • 主编:朱玉贤
  • 地址:广西南宁市大学东路100号广西大学西校园《基因组学与应用生物学》编辑部111室
  • 邮编:530004
  • 邮箱:gab@hibio.org 571388455@qq.com
  • 电话:0771-3239102
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-568X
  • 国内统一刊号:ISSN:45-1369/Q
  • 邮发代号:48-213
  • 获奖情况:
  • 全国优秀高校学校自然科学学报,教育部优秀科技期刊,广西优秀科技期刊,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:4299