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以荧光素酶为报告基因定量检测原型泡沫病毒的指示细胞系的建立
  • ISSN号:0465-7942
  • 期刊名称:南开大学学报(自然科学版)
  • 时间:0
  • 页码:80-84
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]南开大学分子微生物与技术教育部重点实验室,天津300071, [2]南开大学药学院,天津300071
  • 相关基金:国家自然科学基金(30900068,81071343)
  • 相关项目:干扰素诱导蛋白Nmi抗牛泡沫病毒作用机制的研究
中文摘要:

原型泡沫病毒(prototypic foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科.为了在细胞水平定量检测PFV的感染,建立了以萤火虫荧光素酶为报告基因的指示细胞系.在幼小仓鼠肾细胞BHK-21中转染含有PFV LTR启动子及其控制下的荧光素酶报告基因的质粒,经过G418筛选得到稳定整合的细胞系.当PFV感染指示细胞系时,其反式激活因子Tas激活LTR启动子,诱导下游报告基因的表达,通过检测荧光素酶的活性即可对PFV的感染进行定量检测.结果表明,该细胞系可特异指示PFV的感染,相比于传统观察细胞病变的方法,该指示细胞系更为灵敏,是PFV相关研究的有力工具,具有潜在的应用价值.

英文摘要:

Prototypic foamy virus(PFV)belongs to the Spumaretrovirinae subfamily of the Retroviridae family.In order to quantitate PFV infection in vitro,a PFV indicator cell line (PFVL)was established.Baby hamster kidney cells were transfected with reporter plasmid which contains the firefly luciferase gene driven by a PFV long terminal repeat promoter.The PFV transactivator Tas could activate promoter activity of LTR to express luciferase after PFV infection.Then the infection could be quantified by detection of luciferase activity.PFV indicator cell line could detect PFV infection specifically.Compared with standard assays used to detect PFV infection,the PFVL-based assay is more sensitive than the CPE-based assay.In brief,the PFV indicator cell line is an easy,robust and quantitive method for monitoring PFV infection.

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期刊信息
  • 《南开大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南开大学
  • 主编:田建国
  • 地址:天津南开区卫津路94号
  • 邮编:300071
  • 邮箱:
  • 电话:022-23501681
  • 国际标准刊号:ISSN:0465-7942
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1105/N
  • 邮发代号:6-174
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),德国数学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:4822