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CMV与SP双启动子增强外源基因在小鼠骨骼肌中的表达效率
  • ISSN号:1007-7626
  • 期刊名称:《中国生物化学与分子生物学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学] S852.23[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林长春130062, [2]华南农业大学动物科学学院,广东广州510642, [3]河北农业大学海洋学院,河北秦皇岛066003
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(No.30270973,30571335)
中文摘要:

构建分别含有CMV、肌肉特异启动子SP及双启动子CMV-SP的真核报告基因EGFP表达载体(pCMV-EGFP、pSP-EGFP及pCMV-SP-EGFP)和生长激素释放因子(GRF)表达载体(pCMV-GRF、pSP-GRF和pCMV-SP-GRF).将3种EGFP表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌.注射后1周、2周、3周以及4周时,分别提取肌肉组织RNA,应用半定量RT-PCR检测报告基因(EGFP)的表达量,发现pCMV-SP-EGFP组EGFP表达量显著高于pCMV-EGFP组和pSP-EGFP组(P<0.01);经荧光检测得到了较强的荧光信号.将3种GRF表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌,在注射后每隔10 d记录小鼠累积增重,采血并用RIA法测定血清胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)浓度,结果pCMV-SP-GRF组累积增重、IGF-Ⅰ浓度分别高于生理盐水组、pCMV-GRF组和pSP-GRF组(P<0.05).结果表明:CMV与SP两种启动子组合,在小鼠骨骼肌内使外源基因表达效率提高.本研究为提高外源基因在肌肉组织的表达提供了新的途径.

英文摘要:

Six vectors were constructed, which were carrying EGFP or GRF (pCMV-EGFP, pSP-EGFP, pCMV-SP-EGFP, pCMV-GRF, pSP-GRF and pCMV-SP-GRF) driven by CMV promoter, SP promoter and CMV-SP promoters, respectively. They were injected into skeletal muscle of mice to observe their expression efficacy. The differences of EGFP expressions of the vectors were evaluated by semi-quantitative polymerase chain reaction (PCR) at 1, 2, 3 and 4 weeks postinjection. The results showed that the expression of the EGFP with two promoters was significantly higher than the groups of pCMV-EGFP and pSP-EGFP (P 〈 0.01 ). The accumulative weight gain of mice and concentrations of serum IGF-Ⅰwere measured in every 10 days. The results showed that injection of pCMV-SP-GRF lead to accumulative weight gain and serum IGF-Ⅰlevels were significantly higher than the groups of pCMV-GRF and pSP-GRF ( P 〈 0.05). The results indicated that the two promoters combined gained more robust expression of exogenous gene. This result would provide a beneficial exploring to improve the efficiency of gene expression in skeletal muscle.

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期刊信息
  • 《中国生物化学与分子生物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国生物化学与分子生物学会 北京大学
  • 主编:周春燕
  • 地址:北京市学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100083
  • 邮箱:shxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82801416
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-7626
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3870/Q
  • 邮发代号:82-312
  • 获奖情况:
  • 被美国《CA》列入世界引用频次最高的《千种表》
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:9731