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一种适用于家蚕微孢子虫膜蛋白提取的方法
  • ISSN号：0257-4799
  • 期刊名称：蚕业科学
  • 时间：2013.4.4
  • 页码：319-323
  • 分类：Q959.115.92[生物学—动物学] S884.21[农业科学—特种经济动物饲养;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构：[1]家蚕基因组生物学国家重点实验室,西南大学,重庆400716, [2]重庆师范大学动物生物学重点实验室,重庆400047
  • 相关基金：重庆市自然科学基金项目（No.CSTC,2010BB1139）; 国家自然科学基金重点项目（No.30930067/C120110）,国家自然科学基金青年基金项目（No.31001036/C1703）,国家自然科学基金项目（No.31072089/C1703）; 中央高校基本科研业务费专项资金项目（No.XDJK2009C148）; 教育部科学技术重点项目（No.210180）
  • 相关项目：家蚕微孢子虫孢壁蛋白质组及其在侵染中的作用研究
作者： 马强|李田|党晓群|潘国庆|许金山|周泽扬|
关键词： 家蚕微孢子虫, 膜蛋白, 破碎抽提异步法, SDS-PAGE检测, WESTERN, blotting分析
中文摘要：

细胞膜蛋白在家蚕微孢子虫对宿主细胞的抵抗性、物质能量转运和信息传递过程中发挥着重要作用,也是家蚕微粒子病诊断防控的重要候选靶标。依次采用试剂盒直接抽提法、破碎抽提同步法、破碎抽提异步法,对家蚕微孢子虫膜蛋白提取过程中的抽提时间和孢壁处理方式进行优化,通过对提取蛋白质样品的质量检测,明确最佳提取方法。SDS-PAGE检测结果表明,采用破碎抽提异步法在Buffer 2B抽提40 min时能获得较高丰度的膜蛋白,与孢子总蛋白质相比,所得膜蛋白样品中含有丰富的大小为30～170 kD的差异蛋白,进一步利用已知家蚕微孢子虫膜蛋白——类枯草杆菌蛋白酶2的抗体（anti-Nb-SLP2）进行Western blotting分析发现,膜蛋白样品中含有丰富的NbSLP2,表明破碎抽提异步法适用于孢子膜蛋白的提取。此方法的建立将有助于对家蚕微孢子虫膜蛋白的鉴定和功能研究及检测防控候选膜蛋白靶标的筛选。

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期刊信息
  • 《蚕业科学》
  • 北大核心期刊（2011版）
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国蚕学会 中国农业科学院蚕业研究所
  • 主编：郭锡杰
  • 地址：江苏省镇江市四摆渡中国农业科学院蚕业研究所
  • 邮编：212018
  • 邮箱：CYKE@chinajournal.net.cn
  • 电话：0511-85616835
  • 国际标准刊号：ISSN：0257-4799
  • 国内统一刊号：ISSN：32-1115/S
  • 邮发代号:28-23
  • 获奖情况:
  • 中国科协优秀科技期刊,全国农业学会优秀期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘（网络版）,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊（2004版）,中国北大核心期刊（2008版）,中国北大核心期刊（2011版）,中国北大核心期刊（2014版）
  • 被引量:7742