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雨生红球藻八氢番茄红素合成酶基因的克隆及表征
  • ISSN号:1000-3282
  • 期刊名称:《生物化学与生物物理进展》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中国科学院海洋研究所,青岛266071, [2]中国科学院研究生院,北京100039
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30470156),中国科学院创新项目(KZCX3-SW-215).
中文摘要:

雨生红球藻是一种单细胞绿藻,在多种逆境胁迫条件下能够大量合成并迅速积累虾青素,其积累量最高可达细胞干重的4%,从而成为目前最理想的天然虾青素合成工具.八氢番茄红素合成酶(PSY)是虾青素合成途径中第一个限速酶.分离了八氢番茄红素合成酶基因(psy)的全长cDNA及基因组DNA.其全长cDNA包括1200个碱基,编码400个氨基酸,基因组DNA包括5个外显子,4个内含子.系统发育分析结果显示,绿藻的八氢番茄红素合成酶基因形成一个进化枝,它们与高等植物的psy亲缘关系比较近.通过Genome Walking的方法,分离了psy基因约1kb的5’侧翼序列.将含有TATA—box和CAAT—box的297bp的序列与LacZ报告基因构成嵌合的表达载体,用基因枪法转化雨生红球藻.1acZ的瞬间表达检测结果表明,这段上游序列能够驱动lacZ表达,具有启动子活性.

英文摘要:

The unicellular green alga Haematococcus pluvialis accumulates a highly valuable ketocarotenoid, i.e. astaxanthin up to 4% dry weight under stress conditions. Phytoene synthase is considered to be the first rate limiting enzyme in carotenoid biosynthesis pathway in H. pluvial/s. The cDNA and genomic genes of phytoene synthase, i.e. psy fi'om H.pluvialis were cloned and characterized. Result showed that psy had one open reading flame of 1 200 bp encoding a putative polypeptide of 400 amino acids which was interrupted by four introns. Phylogenetic analysis revealed that psy fi'om green algae formed a monophyletic clade, and its closer relationship was higher plants. By using genomic walking approach, an approximate 1 kb 5' flanking region ofpsy gene was cloned and a number of putative c/s-regulatory elements were revealed. Fusing a 297 bp internal sequence (-297 to -1 bp from the translation initiation codon ofpsy) with the reporter gene, i.e. lacZ before attempted introducing the construct into the green alga via particle bombardment resulted in lacZ transient expression.

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期刊信息
  • 《生物化学与生物物理进展》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国科学院生物物理研究所 中国生物物理学会
  • 主编:王大成
  • 地址:北京市朝阳区大屯路15号
  • 邮编:100101
  • 邮箱:prog@sun5.ibp.ac.cn
  • 电话:010-64888459
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-3282
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2161/Q
  • 邮发代号:2-816
  • 获奖情况:
  • 1999年中国期刊奖提名奖,2000年中国科学院优秀期刊特别奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),美国生物科学数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:18821