位置:成果数据库 > 期刊 > 期刊详情页
一种可用于500 μm脑片的高分辨率细胞内标记技术
  • ISSN号:1000-6834
  • 期刊名称:《中国应用生理学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q189[生物学—神经生物学;生物学—普通生物学] R322.8[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]第三军医大学生理学教研室,重庆400038, [2]武警医学院附属医院脑系科中心,天津300162, [3]第三军医大学神经生物学教研室,重庆400038
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30371532);武警医学院博士启动基金(WPS-2007-10)
中文摘要:

目的:建立简便高效的、与脑片盲法膜片钳记录相结合的生物胞素细胞内标记染色方法。方法:制备大鼠听皮层脑片(500 μm),采用盲法脑片膜片钳全细胞记录,泳入生物胞素(0.2%)对记录细胞进行标记,经组织化学显色和甘油封片后,沿显微镜Z轴,每隔30 μm拍摄一帧显微数码图像,利用Adobe Photoshop软件对神经元进行三维重建。结果:标记的神经元层次清楚,可在光镜下分辨出胞体、轴树突分支、棘突等细微结构,而且非特异性背景染色浅;不需要进行厚脑片的二次切片即可对神经元进行三维重建。结论:本方法简便易行,结果可靠,分辨率高,而且对设备要求不高。

英文摘要:

To develop simple but reliable intracellular labelling method for high-resolution visualization of the fine structure of single neurons in brain slice with thickness of 500 μm. Methods: Biocytin was introduced into neurons in 500 μm-thickness brain slices while blind whole cell recording. Following processed for histochemistry using the avidin-biotin-complex method, stained slices were mounted in glycerol on special glass slides. Labelled cells were digital photomicrographed every 30 μm and reconstructed with Adobe Photoshop software. Results: After histochemistry, limited background staining was produced. The resolution was so high that fine structure, including branching, termination of individual axons and even spines of neurons could be identified in exquisite detail with optic microscope. With the help of software, the neurons of interest could be reconstructed from a stack of photomicrographs. Con-clusion: The modified method provides an easy and reliable approach to revealing the detailed morphological properties of single neu-rons in 500 μm-thickness brain slice. Without requisition of special equipment, it is suited to be broadly applied.

同期刊论文项目
同项目期刊论文
期刊信息
  • 《中国应用生理学杂志》
  • 北大核心期刊(2008版)
  • 主管单位:
  • 主办单位:中国生理学会 卫生学环境医学研究所 军事医学科学院
  • 主编:汪海
  • 地址:天津市大理道1号
  • 邮编:300050
  • 邮箱:tjzgyish@163.com
  • 电话:022-84655184
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-6834
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1339/R
  • 邮发代号:6-16
  • 获奖情况:
  • 国家印刷质量二等奖,国防科技期刊一等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国生物医学检索系统,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:9411