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家蚕一个DDRGK超家族成员的克隆及分析
  • ISSN号:2095-1353
  • 期刊名称:《应用昆虫学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q71[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]浙江理工大学生物化学研究所,杭州310018
  • 相关基金:国家863计划基金(2007AA100504); 国家自然科学基金(30770279); 国家863计划基金(2007AA021703)
中文摘要:

DDRGK类蛋白是在动物及植物中发现的约有300个氨基酸残基的蛋白家族,含有一个高度保守的DDRGK基序,但功能还未知。在对家蚕幼虫cDNA文库的测序中发现了含有该保守结构域的EST序列,经过电子克隆、RT-PCR,获得该基因完整的cDNA序列,将其命名BmDDRGK(GenBank登录号FJ645927)。然后构建了重组质粒转化到大肠杆菌BL21和Rosetta中诱导表达,但经SDS-PAGE检测未检测到重组蛋白的表达。利用Real-timePCR技术对BmDDRGK在家蚕五龄幼虫期和蛹期不同组织的mRNA表达水平进行了鉴定。绝对定量结果显示BmDDRGK在家蚕五龄幼虫期和蛹期的各个组织中均有较为明显的表达,在五龄幼虫期,以中肠、马氏管、睾丸表达量较高,在蛹期,以翅原基、睾丸的表达量较高。

英文摘要:

DDRGK is a family of proteins of approximately 300 residues found in plants and animals which contain a highly conserved DDRGK motif.However,the function of this family is still unknown,up to now.The ESTs of DDRGK are found through searching cDNA library of silkworm puper.A full length cDNA is found by EST cloning and RT-PCR methords,named this gene BmDDRGK(GenBank Accession No.FJ645927).The recombinant plasmid is transformed into E.coli BL21 and Rosetta.But recombinant protein is undetectable by SDS-PAGE analysis with the IPTG induction.The mRNA expression lever of BmDDRGK in the tissues of 5th larva and pupae is analyzed by real-time PCR.And result shows that BmDDRGK is expressed obviously in every tissue in the two stages by absolute quantitation analysis.Furthermore,it is expressed highly in midgut,malpighian tubule,testis of 5th larva,highly in wing disk,testis of pupae.

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期刊信息
  • 《应用昆虫学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国昆虫学会 中国科学院动物研究所
  • 主编:戈峰
  • 地址:北京朝阳区北辰西路1号院5号中科院动物所
  • 邮编:100101
  • 邮箱:entom@ioz.ac.cn
  • 电话:010-64807137
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-1353
  • 国内统一刊号:ISSN:11-6020/Q
  • 邮发代号:2-151
  • 获奖情况:
  • 96、2000年获中科院《优秀期刊三等奖》,92年获中国科协《优秀学术期刊一等奖》,2001进入“中国期刊”方阵,“双百”期刊,排名第96位
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:3170