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亚洲棉5号染色体RGAs克隆与分析
  • ISSN号:1000-2367
  • 期刊名称:河南师范大学学报
  • 时间:2012.6.6
  • 页码:120-123
  • 分类:S562.035[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室,河南安阳455000, [2]安阳工学院生物与食品工程学院,河南安阳455000
  • 相关基金:基金项目:国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08005.003),国家自然科学基金(31071466)
  • 相关项目:陆地棉1号染色体物理图谱的构建
中文摘要:

采用前低渗、酶解、后低渗和盖片轻压相结合的方法,建立了激光法分离二倍体亚洲棉石系亚1号单条染色体技术。单染色体经去蛋白、酶切和PCR扩增后,产物以Southern杂交、简单重复序列(Simplesequencerepeats,SSR)引物扩增和荧光原位杂交技术(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)进行验证,构建了棉花单条染色体文库。克隆片段长度在150~1000bp,平均为550bp;文库包含1.38x10s个克隆,覆盖染色体长度1倍左右,空载率为1%,滴度为1.3×10^6 pfu·mL-1,单一拷贝和低拷贝比例达到59%以上,为该条染色体分子标记_的筛选、重要基因克隆和定位、遗传图谱的饱和奠定基础.

英文摘要:

In order to obtained the high-quality well-differentiated mitotic metaphase chromosomes with clear background for laser microdissection in cotton, integrated toothed of prehypotonicity, enzymolysis, post-hypotonicity and squashed on mitotic metaphase root tip cell was adopted, the high quality preparations of Gossypium arboreum were obtained, and the single chrom- some laser cutting technique in cotton was constructed. Amplified single chromosome production was verified by the integrated method of simple"sequence repeats (SSR) primer amplification, Southern blotting and fluorescence in situ hybridization (FISH). The 7th chromosome library of Shixiya No. 1, a variety of G. arboreum was constructed. The library contains 1.38×10^5 clones, which almost cover 1 time of the chromosome length. The inserts averaged 550 bp, varied from 150 bp to 1000 bp. And the titer was 1.3×10^6 pfu.mL-1, rate of no-load was 1%, and the ration of single and low copy sequences were over 59%. The library will facilitate the specific probe screening, gene cloning and sitting, genetic map saturation on this chromosome.

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期刊信息
  • 《河南师范大学学报:自然科学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:河南师范大学
  • 主办单位:河南师范大学
  • 主编:王记录
  • 地址:河南省新乡市建设东路46号
  • 邮编:453007
  • 邮箱:
  • 电话:0373-3329394 3329272
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2367
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1109/N
  • 邮发代号:36-55
  • 获奖情况:
  • 国家新闻出版局、国家科委优秀学报奖,河南省科委、河南省教委优秀学报
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:7535