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玉米C4型PEPC全长基因的克隆与表达载体构建
  • ISSN号:1002-1302
  • 期刊名称:《江苏农业科学》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学] S513.01[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]沈阳农业大学生物科学技术学院、辽宁省植物基因工程技术研究中心,辽宁沈阳110866
  • 相关基金:国家自然科学基金(编号:31000673);教育部博士点基金(编号:20102103110001、20102103120001);辽宁省科技厅科技攻关项目(编号:201201238).
中文摘要:

以玉米自交系郑58基因组DNA为模板,设计了2对特异性引物,分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)启动子及其全长编码序列,利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体pCAMBIA-1391Z上,并对重组子进行测序验证。结果表明,该PEPC启动子序列与GenBank中的玉米自交系B73的同源性为97.70%,片段长1200 bp;全长编码序列同源性为97.90%,片段长6330 bp。通过HindⅢ和EcoRⅠ酶切载体pCAMBIA-1391Z,利用In-Fusion技术将线性载体与之前获得的2个 PCR 片段连接,测序结果与预期序列一致,表明成功构建了pCAMBIA-1391Z-PEPC 植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论,以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C 4型 PEPC基因功能研究和C 3植物遗传转化提供可用的基因序列。

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期刊信息
  • 《江苏农业科学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:江苏省农业科学院
  • 主办单位:江苏省农业科学院
  • 主编:常有宏
  • 地址:南京孝陵卫钟灵街50号
  • 邮编:210014
  • 邮箱:jsnykx@vip.163.com
  • 电话:025-84390282
  • 国际标准刊号:ISSN:1002-1302
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1214/S
  • 邮发代号:28-10
  • 获奖情况:
  • 第二届国家期刊奖百种重点期刊奖,全国优秀科技期刊奖,江苏省“双十佳”期刊奖,国家期刊奖提名奖,华东地区优秀期刊,优秀农业期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:38904