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腺病毒载体对骨髓间充质干细胞体外分化能力的影响
  • ISSN号:1005-8982
  • 期刊名称:《中国现代医学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:R331.22[医药卫生—人体生理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]解放军总医院老年心血管二科,北京100853, [2]解放军总医院心血管内科,北京100853, [3]军事医学科学院放射医学研究所实验血液学研究室,北京100850
  • 相关基金:国家自然科学基金青年基金面上项目(No:30400182)
中文摘要:

目的研究腺病毒载体对Wistar大鼠骨髓间充质干细胞体外分化能力的影响。方法密度梯度离心加贴壁培养法自2周龄Wistar大鼠骨髓中分离培养MSC,用携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒载体(Ad-GFP)感染,48 h后用流式细胞仪检测感染效率;在特殊诱导剂诱导下,用碱性磷酸酶(ALP)染色、ALP活性及油红O染色分别鉴定腺病毒载体对MSCs成骨和成脂分化潜能的影响。结果 Ad-GFP感染MSC 48 h后97.82%的细胞表达GFP;MSC经特异性诱导剂诱导后可向脂肪及成骨细胞分化,Ad-GFP感染对MSC成脂及成骨分化能力无显著影响。结论腺病毒载体对大鼠骨髓MSC感染效率高,且不影响其体外多向分化潜能,是基因修饰MSC的理想载体。

英文摘要:

【Objective】 To identify whether adenovirus-mediated gene transfer strategy interferes with the differentiation potentials of rat bone marrow mesenchymal stem cells(MSC).【Methods】 MSC were isolated from the femoral and tibial bones of 2-week-old Wistar rats by density gradient centrifugation and purified on the basis of their ability to adhere to plastic.MSC were infected by an adenoviral vector carrying green fluorescent protein gene(Ad-GFP) and 48 hours later,the infection efficiency was assessed with flow cytometry,and their osteogenic and adipogenic differentiation potentials were identified by histological and molecular methods.【Results】 Ad-GFP infected MSC with a high efficiency of 97.82% around.Gene-modified MSC could differentiate into adipocytes and osteoblasts in vitro under specific inductive conditions,which was indentified by Oil-Red O and alkaline phosphatase staining.Ad-GFP infection did not affect MSC in the osteogenic or adipogenic differentiation potential.【Conclusion】Exogenous gene transfer into Wistar rat’s MSC can be efficiently conducted by the adenoviral vector.Adenovirus-mediated gene transfer does not interfere with their differentiation capability,and this kind of adenoviral vectors could be used for the ex vivo modification of MSC.

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期刊信息
  • 《中国现代医学杂志》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学 中南大学 中华人民共和国卫生部肝胆肠外科研究中心
  • 主编:陈子华
  • 地址:湖南省长沙市湘雅路87号
  • 邮编:410008
  • 邮箱:cjmm@2118.cn
  • 电话:0731-4327993 4803066
  • 国际标准刊号:ISSN:1005-8982
  • 国内统一刊号:ISSN:43-1225/R
  • 邮发代号:42-143
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),波兰哥白尼索引,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:59532