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苹果属小金海棠MxIrt1基因特异性片段的原核表达及多克隆抗体的制备
  • ISSN号:0513-353X
  • 期刊名称:园艺学报
  • 时间:0
  • 页码:627-635
  • 语言:中文
  • 分类:S661.1[农业科学—果树学;农业科学—园艺学] Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]中国农业大学园艺植物研究所,北京100193, [2]吉林农业大学生命科学学院,长春130118
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(30671441,30700545);北京市果树逆境生理与分子生物学重点实验室项目.
  • 相关项目:小金海棠MxIrt1基因功能研究及转基因苹果砧木新材料的筛选
中文摘要:

MxIrt1是从苹果属植物小金海棠中克隆出的二价阳离子转运膜蛋白基因。为进一步研究该基因的功能,利用MxIrt1基因位于第3和第4跨膜区之间的162bp片段,构建了原核表达载体pGEX-MxIrt1,经原核表达、亲和层析、获得GST-MxIRT1融合蛋白,以融合蛋白为抗原,制备多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价阳性,蛋白质印迹检测植物体内总蛋白,获得与预期大小一致的特异性条带。上述结果表明,表达的目的蛋白可用于免疫组织化学、蛋白质印迹检测。

英文摘要:

Mxlrtl is a iron transport protein gene from Malus xiaojinensis. To study the functional characteristic of MxIrtl, the recombinant plasmid pGEX-Mxlrtl was constructed with 162 bp segments between 3rd and 4th TMR (Transmembrane region), following the expression in E. coli with high efficiency, purification using Glutathione Sepharose 4B, the recombinant GST-MxIRT1 protein was obtained. ELISA assay detected the reactivity of the polycolonal antibody and Western blot shows that specific band was corresponding to the ex- pectation. The recombinant GST-MxIRT1 protein can also be used for immunohistochemistry.

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期刊信息
  • 《园艺学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国园艺学会
  • 主编:杜永臣
  • 地址:北京市中关村南大街12号
  • 邮编:100081
  • 邮箱:ivfyyxb@mail.caas.net.cn
  • 电话:010-68919523
  • 国际标准刊号:ISSN:0513-353X
  • 国内统一刊号:ISSN:11-1924/S
  • 邮发代号:82-471
  • 获奖情况:
  • 第一届全国优秀期刊奖,中国科协第三届优秀期刊奖,第二届国家期刊奖提名奖,中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:43371