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病毒滴度和插入子长度对慢病毒载体介导的转基因小鼠整合率的影响
  • ISSN号:1674-5817
  • 期刊名称:《实验动物与比较医学》
  • 时间:0
  • 分类:Q95-33[生物学—动物学]
  • 作者机构:[1]上海市儿童医院、上海交通大学附属儿童医院、上海医学遗传研究所,上海200040, [2]卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖工程重点实验室,上海200040
  • 相关基金:上海市自然科学基金(11ZR1429900),上海市科委实验动物研究项目(12140900600)
中文摘要:

目的研究病毒滴度和插入子长度对于慢病毒载体介导的转基因小鼠整合率的影响。方法制备了18种不同长度插入子的慢病毒载体,通过受精卵卵周隙注射的方法获得转基因小鼠,然后通过PCR技术检测其转基因小鼠的整合率,并对所生成的数据进行统计学分析。结果插入子长度在较短(〈2kb)的情况下,病毒滴度达到2×10^8就可获得较高的整合率,在插入子长度稍长(4-5kb)的情况下,需要1×10^9滴度才能获得较高的整合率,而在插入子长度大于6kb的情况下,未能用该方法获得转基因小鼠。结论滴度的增加能有效提高慢病毒载体制备转基因小鼠的整合率,而当滴度适中(-2×10^8)时,整合率随插入子长度的增加而下降。

英文摘要:

Objective To study the effeet of viral particle titer and the transgene length on the integration rate of transgenic mice mediated by lentiviral vector particles. Methods Eighteen kinds of lentiviral vectors particles, which carded various lengths of inserts, were used for subzonal injection of mouse fertilized eggs, followed with transplanting those eggs into the oviduct of pseudopregnanting mice. Neonates were then identified by PCR analysis. Results For short inserts (〈2 kb), only 2 x l0s of virus titer was needed to achieve a high integration rate. While the length of inserts were increase (4-Skb), 1 × 10^9 viral particles were required for having a reasonable integration rate. However, transgenic mice was not able to be achieved when the inserts were longer than 6kb, in our hands. Conclusion Integration rate of transgenic mice was largely affected by both the viral titer and the length of inserts. It increases with the particle titer, while decreases with the length of inserts

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期刊信息
  • 《实验动物与比较医学》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:上海科学院
  • 主办单位:上海市实验动物学会 上海实验动物研究中心
  • 主编:高诚
  • 地址:上海市金科路3577号
  • 邮编:201203
  • 邮箱:bjb50793657@163.com
  • 电话:021-50793648-81018 50793657
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-5817
  • 国内统一刊号:ISSN:31-1954/Q
  • 邮发代号:4-789
  • 获奖情况:
  • 首届《CAH-CD规范》执行优秀奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊
  • 被引量:2091