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基于石英毛细管载体的血清甲胎蛋白灰度分析免疫检测法
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:O657.71[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]北京理工大学,生命学院,工业和信息化部融合医工系统与健康工程重点实验室,北京100081, [2]国家纳米科学中心,纳米生物效应与安全性实验室,北京100190, [3]解放军总医院南楼检验科,北京100853
  • 相关基金:工业及信息化部重点实验室2016年开放课题项目; 国家自然科学基金项目(No.21675012); 中国科学院先导专项(No.XDA09030305)资助
中文摘要:

以熔融石英毛细管为免疫分析载体材料,以肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)为模型蛋白,将AFP捕获抗体固定于毛细管,AFP和AFP的辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体分别注入毛细管进行孵育,形成双抗体夹心结构。注入化学发光底物液后,HRP催化底物液发光,产生的光信号通过成像仪转化为图片。对图片进行灰度值分析,建立了血清甲胎蛋白的定量免疫分析检测法。当捕获抗体稀释倍数为100,酶标抗体稀释倍数为200,化学发光曝光时间为20 s时,本方法可在3.1-50 ng/m L浓度范围实现甲胎蛋白测定,检出限为2.7 ng/m L。对20例人血清临床实际样本进行检测,结果令人满意,加标回收率在96.0%-106.7%之间。本方法样本消耗少、材料简单、检测成本低、不依赖大型仪器、适用性广,具有较好的临床检验应用前景。

英文摘要:

A fused quartz capillary was taken as the carrier for the immunoassay of the tumor marker alpha fetal protein(AFP) as a model protein.The capture antibody of AFP was immobilized in capillary.Based on a sandwich immunoassay format,the antigen and corresponding horseradish peroxidase(HRP) labeled antibodies were introduced into the capillary for online incubation.After the injection of the chemiluminescence substrate,the chemiluminescence signals were captured by the CCD camera and changed into figures.The results could be read by gray level analysis of the figures.When the capture antibody was diluted 100 times,the enzyme labeled antibody was diluted 200 times,and the exposure time was 20 s,the detection range of AFP was 3.1-50 ng/m L and the critical concentrations of 20 ng/m L clinical applications were covered.The limit of detection was 2.7 ng/m L.Twenty clinical samples were tested with fine accuracy.The recoveries of the spiked samples were between 96.0% and 106.7%.In the assay,the sample consumption was low and the experimental material was simple and cheap.The method does not require large instruments,and is appropriate for clinical application

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:52455