目的采用高效液相色谱法建立两面针的HPLC色谱指纹图谱分析方法,为其品质控制提供可靠依据。方法采用HPLC-UV分析两面针的指纹图谱。色谱柱:UltimateTMXB C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水(0.2%磷酸+0.2%三乙胺)(A)-乙腈(B),梯度洗脱:0~5 min,8%~12%B;5~7 min,12%~15%B;7~14 min,15%~21%B;14~35 min,21%~25%B;35~40 min,25%~36%B;40~60 min,36%~52%B;60~80 min,52%~100%B;80~95 min,100%B;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长250 nm,测定24批两面针指纹图谱,应用相似度分析、系统聚类分析,对两面针进行分类研究。结果在色谱指纹图谱中,确定了22个共有峰,根据相似度分析、系统聚类分析的结果,将24批药材分为2类。结论该指纹图谱检测方法方便,重现性好,可用于两面针质量控制。