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人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体的表达和生物学活性检测
  • ISSN号:0529-1356
  • 期刊名称:《解剖学报》
  • 时间:0
  • 分类:R338.21[医药卫生—人体生理学;医药卫生—基础医学]
  • 作者机构:[1]中山大学中山医学院组织学胚胎学教研室神经科学研究室, [2]中山大学肿瘤防治中心,广州510080, [3]昆明医学院神经研究所,昆明650031
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30270700);广东省社会发展攻关项目(2003C33808);高等学校博士学科点专项科研基金(2004558068)
中文摘要:

目的探讨人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体(Adeno—TrkC)在神经干细胞内的表达及其对神经干细胞的生物活性作用。方法用RT-PCR检测Adeno—TrkC感染的293细胞的TrkCmRNA含量。用免疫细胞化学和Western blotting检测Adeno—TrkC感染的神经干细胞表达TrkC受体蛋白。在体外培养条件下,观察人神经营养素-3(NT-3)对感染了Adeno—TrkC的神经干细胞分化为神经元样细胞和星形胶质样细胞的影响。结果在Adeno—TrkC感染的293细胞和神经干细胞中检测到TrkCmRNA和TrkC受体蛋白,且表达产物和其配体NT-3结合后能使体外培养的神经干细胞更多地分化为神经元样细胞,分化率达到55.2%,均高于其他对照组。结论Adeno-TrkC能在神经干细胞内表达TrkC受体蛋白.这种TrkC受体蛋白具有促进神经干细胞分化为神经元样细胞活性的作用,这为进一步应用NT-3和TrkC联合进行基因治疗中枢神经损伤研究奠定了基础。

英文摘要:

Objective To detect the expression and the biological activity of a recombinant adenovirus expression vector carrying human neurotrophin-3 (NT-3) receptor TrkC gene (Adeno-TrkC) in neural stem cells. Methods The expression of TrkC mRNA in 293 cells infected with Adeno-TrkC was detected by RT-PCR, and the expression of TrkC protein in neural stem cells infected by Adeno-TrkC was detected with immunocytochemistry and Western blotting. The effects of human neurotrophin-3 ( NT- 3) on the neural stem cells infected by Adeno-TrkC differentiating into neuron-like cells and astrocyte-like cells in vitro were observed. Results The transcription of TrkC mRNA and the expression of TrkC protein was detected in 293 cells and neural stem cells infected by Adeno-TrkC, This kind of TrkC was able to make more neural stem cells differenting into neuron-like cells in vitro with its ligand NT-3 and the percentage of neuron-like cell's differentiation was 55.2% which was higher than that of other control groups. Conclusion TrkC protein is expressed in neural stem cells transfected with Adeno-TrkC and is able to make neural stem cells differenting into neuron-like cells. The present study may provide the basis on gene therapy of central nervous injury using further NT-3 and TrkC.

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期刊信息
  • 《解剖学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科协
  • 主办单位:中国解剖学会
  • 主编:章静波
  • 地址:北京海淀区学院路38号北京大学医学部
  • 邮编:100191
  • 邮箱:jpxb@bjmu.edu.cn
  • 电话:010-82802969
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-1356
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2228/R
  • 邮发代号:2-249
  • 获奖情况:
  • 1992年中国科协优秀学术期刊三等奖,1997年第二届全国优秀科技期刊二等奖,97、98、99连续三年科技基础性和高科技期刊资助三等奖,中国期刊方阵“双百”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:9672