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条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取方法的比较及LD-PCR扩增
  • ISSN号:1009-1041
  • 期刊名称:《麦类作物学报》
  • 时间:0
  • 分类:S512.1[农业科学—作物学] S332.2[农业科学—作物遗传育种;农业科学—农艺学]
  • 作者机构:[1]西北农林科技大学植物保护学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西杨凌712100
  • 相关基金:教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT0558);教育部重大科技培育项目(2004225);国家自然科学基金资助项目(30671350).
中文摘要:

为寻找一种既能提取到高质量高产量小麦RNA、又能提取到高质量条锈菌RNA的方法,利用Trizol法、Licl法、SDS法和Bizol法分别从条锈菌诱导的小麦叶片中提取了总RNA,并对Trizol法和Bizol法提取的RNA进行了长距离PCR(LD-PCR)扩增。结果表明,Trizol法、Licl法、SDS法和Bizol法提取的RNA产量(μg/100mg鲜重叶片)分别为4.72、1.15、1.56、10.43μg/100 mg,Trizol法和Bizol法提取的RNA产量明显高于Licl法和SDS法。Trizol法提取的RNA合成的cDNA片段大小主要集中在0.25-2.0 kb范围内,而Bizol法提取的RNA合成的cDNA片段大小主要集中在0.5-5.0 kb范围内,Bizol法提取的RNA反转录合成的cDNA质量好于Trizol法。Bizol法同样能提取到高质量的条锈菌RNA,而且提取RNA的成本较低。综合各种因素,Bizol法是条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取的较理想方法。

英文摘要:

To find a protocol of extracting RNA that has high production and good quantity from both wheat leaves and rust, Trizol, Licl,SDS and Bizol protocols were used for extracting total RNA from rust induced wheat leaves, total RNA extracted by Trizol and Bizol protocols was amplified by long distance PCR (LD-PCR). The results showed that total RNA production of wheat leaves (μg/100 mg leaves) extracted by Trizol, Licl, SDS and Bizol protocols were 4.72,1.15,1.56,10.43 kg/100 mg, respectively, total RNA production of wheat leaves extracted by Trizol and Bizol protocols were obvi- ously higher than that by Licl and SDS protocols, cDNA synthesized from RNA extracted by Trizol was mainly 0.25-2.0 kb, cDNA synthesized from RNA extracted by Bizol was mainly 0.5-5.0 kb, cDNA synthesized from RNA extracted by Bizol was better than that by Trizol. RNA of rust can also be extracted by Bizol and it cost less. Considering all aspects, Bizol protocol is the best one to extract RNA from rust induced wheat leaves.

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期刊信息
  • 《麦类作物学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:西北农林科技大学 中国作物学会 国家小麦工程技术研究中心
  • 主编:孙其信
  • 地址:陕西省杨凌邰城路3号《麦类作物学报》编辑部
  • 邮编:712100
  • 邮箱:mlzwxb@163.com
  • 电话:029-87082032
  • 国际标准刊号:ISSN:1009-1041
  • 国内统一刊号:ISSN:61-1359/S
  • 邮发代号:52-66
  • 获奖情况:
  • 从2003年起被收录为国家科技部“中国科技核心期刊”,2002年获第三届全国优秀农业期刊一等奖,1999年获陕西省科技期刊一等奖,1995年获陕西省优秀期刊二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:13981