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高效液相色谱-电喷雾串联四级杆质谱法检测小鼠组织中花生四烯酸及其代谢产物
  • ISSN号:0253-3820
  • 期刊名称:《分析化学》
  • 时间:0
  • 分类:O657.72[理学—分析化学;理学—化学]
  • 作者机构:[1]中国科学院大连化学物理研究所,中国科学院分离分析化学重点实验室,大连116023, [2]沈阳药科大学药学院,沈阳110016
  • 相关基金:国家自然科学基金(Nos.20835006 20675082 20805045)资助
中文摘要:

采用反相高效液相色谱梯度洗脱,电喷雾串联质谱多反应检测模式,同时分离测定小鼠组织中花生四烯酸类代谢产物。组织样品经低温超声破碎细胞,采用乙酸乙酯进行两次萃取,LC-MS/MS检测。实验用3个内标,标准溶液稀释法建立了19种花生四烯酸类物质的标准曲线。方法学确证表明:各被测物质的线性相关系数均大于0.99;定量限(LOQ)为3~250μg/L;相对回收率在70.7%~123.0%之间;方法重复性(RSD)均小于20%。运用本法在小鼠肺、肝、脾组织中检测到了几种花生四烯酸类代谢产物,并对肺组织里的8种代谢产物进行了含量测定,结果为11-羟基二十碳四烯酸(58.3±11.6)ng/g,15-羟基二十碳四烯酸(52.6±15.5)ng/g,前列腺素E2(210±102)ng/g,前列腺素D2(20.3±13.9)ng/g,前列腺素J2(39.2±15.9)ng/g,血栓素B2(58.3±28.4)ng/g,前列腺素F2α(3.8±6.0)ng/g,花生四烯酸(1980±544)ng/g。本方法灵敏度高、重复性良好,为研究生物组织样品中花生四烯酸类物质的代谢状况提供了分析基础。

英文摘要:

A reversed phase liquid chromatography/tandem mass spectrometry method was developed to simultaneously analyze arachidonic acid(AA) and its metabolites such as prostaglandins(PGs),thromboxane(TXB2),epoxyeicosatrienoic acids(EETs),dihydroxyeicosatrienoic acids(DHETs) and hydroxyeicosatetraenoic acids(HETEs) through the corresponding cyclooxygenase,cytochrome P450,and lipoxygenase pathways in mice tissues. Ethyl acetate extraction was employed for sample preparation after sonication in an ice bath,and the organic phase was dried under vacuum and dissolved in methanol for the LC-MS/MS analysis. 22 standard compounds were separated within 50 min using a gradient elution of acetonitrile and water with 0.05% formic acid(V/V) on a C18 column(250 mm×4.6 mm,5 μm). PGB1 and deuterium labeled 15-HETE-d8 and AA-d8 were used as internal standards. Mass spectrometric detection was performed using negative electrospray ionization and multiple reaction monitoring. The method was validated and shown to be accurate(recovery values 70.7%-123.0%),precise(RSD 20%) and sensitive(LOQ 3-250 μg/L). The method was applied to separate arachidonic acid(AA) and its metabolites in lung,liver and spleen tissues in mice and quantify eicosanoid levels in lung tissue. The results were 11-HETE(58.3±11.6) ng/g,15-HETE(52.6±15.5) ng/g,PGE2(210±102) ng/g,PGD2(20.3±13.9) ng/g,PGJ2(39.2±15.9) ng/g,TXB2(58.3±28.4) ng/g,PGF2α(3.8±6.0) ng/g and AA(1980±544) ng/g,respectively.

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期刊信息
  • 《分析化学》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国科学院
  • 主办单位:中国化学会 中国科学院长春应用化学研究所
  • 主编:杨秀荣
  • 地址:长春市人民大街5625号
  • 邮编:130022
  • 邮箱:fxhx@ciac.ac.cn
  • 电话:0431-85262017
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-3820
  • 国内统一刊号:ISSN:22-1125/O6
  • 邮发代号:12-6
  • 获奖情况:
  • 1999获首届国家期刊奖,2000年获中国科学院优秀期刊特别奖,2001年入选中国期刊方阵“双高”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,美国工程索引,美国乌利希期刊指南,美国剑桥科学文摘,美国科学引文索引(扩展库),日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
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