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DOP—PCR阴性对照中的产物分析及引物浓度的优化
  • ISSN号:1671-8836
  • 期刊名称:《武汉大学学报:理学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q343[生物学—遗传学]
  • 作者机构:[1]武汉大学生命科学学院,湖北武汉430072
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30370772,3040004)
中文摘要:

由于在DOP—PCR实验过程中,通常的防污染措施和刘反应体系及条件的优化都无法完全消除阴性对照中出现的扩增产物,因此本研究对上述扩增产物进行了纯化、克隆和测序,发现该产物并非污染所致,而是由于引物自身的兼并性,序列相互配对而产生的引物多集体;并且还对与废扩增产物产量密切相关的引物浓度进行了优化探讨,实验结果表明2.2μmol/L是减少该产物产量的比较理想的引物浓度.

英文摘要:

In DOP-PCR experiment, amplification product often generate in negative control. The measures preventing contamination in common and the optimization for reaction's system and condition can not erase this phenomenon completely. By sublimation,cloning and sequencing for amplification product, it is found that they are generated not because of the contamination but the degeneracy of primer. Thedegenerate sequences pair each other and generate the primer polymer. The concentration of primer is very important to the amplification product's yield. So the optimizing study on primer's concentration of reaction condition is carried on in this experiment as well. And the result shows that 2. 2 μmol/L is better eoneen tration to reduee the yield of amplifieation product.

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期刊信息
  • 《武汉大学学报:理学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国2教育部
  • 主办单位:武汉大学
  • 主编:刘经南
  • 地址:湖北武昌珞珈山
  • 邮编:430072
  • 邮箱:whdz@whu.edu.cn
  • 电话:027-68756952
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-8836
  • 国内统一刊号:ISSN:42-1674/N
  • 邮发代号:38-8
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,荷兰文摘与引文数据库,美国剑桥科学文摘,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:6988