中文摘要：

目的构建血管内皮细胞生长因子（VEGF）基因和铜绿假单胞菌外毒素衍生物（PE38）基因的真核融合表达载体，并研究其表达产物对U251细胞的影响。方法通过PCR获得本实验需要的VEGF165基因片段，通过酶切pRB391质粒获得铜绿假单胞菌外毒素衍生物PE38基因，再通过适当的酶切及连接反应，构建VEGF165与PE38融合基因的真核表达载体plRES2-VEGF165-PE38．EGFP，经酶切及DNA测序证实构建成功后，用Lipofectamine2000脂质体转染293细胞，然后用RT—PCR及Elisa法检测VEGF165-PE38融合蛋白在293细胞的表达，并利用转染细胞后的培养上清体外测定VEGFl65-PE38融合蛋白对U251的选择性细胞毒作用。结果酶切分析及DNA测序证实，VEGF165-PE38融合基因被成功克隆入真核表达质粒载体plRES2-EGFP，RT—PCR及Elisa法检测证实重组基因可在293细胞表达，细胞转染上清对U251具有较强的细胞抑制效应。结论VEGF165-PE38融合基因构建，表达及其功能的初步研究，为进一步研究其对胶质瘤的靶向毒性及临床应用奠定基础。