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马钱苷人工抗原的合成、鉴定及免疫原性的初步研究
  • ISSN号:0253-2670
  • 期刊名称:《中草药》
  • 时间:0
  • 分类:R283.6[医药卫生—中药学;医药卫生—中医学]
  • 作者机构:[1]北京中医药大学基础医学院,北京100029, [2]中日友好医院临床医学研究所药物药理室,北京100029, [3]北京中医药大学科研中心,北京100029, [4]北京中医药大学“经典方剂的应用基础研究”创新团队,北京100029
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(81473590,81473119,81274115); 教育部新世纪优秀人才项目(NCET-11-0606); 北京市优秀人才培养资助项目(2013D 009999000001)
中文摘要:

目的首次合成并鉴定马钱苷(loganin)人工抗原,为进一步制备马钱苷单克隆抗体,建立相关免疫分析方法奠定基础。方法采用高碘酸钠氧化法合成马钱苷免疫原(loganin-BSA)和包被原(loganin-OVA);应用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法鉴定马钱苷人工抗原是否偶联成功;通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测免疫小鼠血清中抗马钱苷抗体效价及其特异性。结果经MALDI-TOF-MS检测,马钱苷与BSA偶联成功。竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与马钱苷产生特异性结合,血清抗体效价在1∶40 000。结论成功合成了马钱苷人工抗原,为马钱苷单克隆抗体的制备及其在中药质量评价和动物体内药动学方面的应用奠定了基础。

英文摘要:

Objective To synthesize and identify the artificial antigen of loganin for the first time, and provide a foundation for the preparation of specific monoclonal antibody and establishment of immunoassay method. Methods Sodium periodate oxidation method was used to synthesize immunogenic antigen(loganin-BSA) and coating antigen(loganin-OVA) of loganin. Whether loganin was conjugated with BSA and OVA or not was confirmed by matrix-assisted laser desorption ionization/time-of-flight mass spectrometry(MALDI-TOF-MS). The titer and specificity of the antibody in serum of immunised mice were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). Results The results of MALDI-TOF-MS indicated that loganin was conjugated to BSA. The antibody against loganin obtained from immunised-mice could bind to loganin and the titer was up to 1∶40 000. Conclusion The artificial antigen of loganin was synthesized, which can be used further in the preparation of monoclonal antibody, application in quality control of Chinese materia medica and the pharmacokinetic study of loganin in laboratory animals.

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期刊信息
  • 《中草药》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:天津市科委
  • 主办单位:中国药学会 天津药物研究院
  • 主编:汤立达
  • 地址:天津市南开区鞍山西道308号
  • 邮编:300193
  • 邮箱:zcy@tiprpress.com
  • 电话:022-27474913 23006821
  • 国际标准刊号:ISSN:0253-2670
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1108/R
  • 邮发代号:6-77
  • 获奖情况:
  • 国家期刊奖,国家“双奖”期刊,1992年获国家科委、中共中央宣传部、国家新闻出版...
  • 国内外数据库收录:
  • 美国国际药学文摘,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,荷兰文摘与引文数据库,荷兰医学文摘,美国剑桥科学文摘,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:90909