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稳定转染CD151或CD163的Marc145细胞系的建立及其在PRRS疫苗生产中的应用
  • ISSN号:0529-6005
  • 期刊名称:《中国兽医杂志》
  • 时间:0
  • 分类:S852.651[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]武汉市农科院畜牧兽医科学研究所,湖北武汉430208, [2]武汉市重大动物疫病防控中心,湖北武汉430023, [3]华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,湖北武汉430070
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31201938);武汉市科技局项目(2013020705070350-9,-14);武汉市农业科学院创新项目(CX201309);武汉市农业科学院青年英才项目(YC201101)
中文摘要:

为了进一步探讨提高PRRSV感染靶细胞滴度的有效方法,本研究采用脂质体介导方法,通过G418筛选稳定转染Marcl45细胞,并利用单个细胞克隆技术,获得了稳定超表达CDl51蛋白和(或)CDl63蛋白的Marcl45细胞株,经免疫荧光化学和Westem Blot鉴定证实,成功表达出基因重组猪CDl51蛋白和CDl63蛋白。在GMP生产车间将超表达CDl51、CDl63蛋白或CDl51/CDl63蛋白共表达的Marcl45细胞感染PRRSV,使病毒感染滴度提高了10倍以上。将上述收获的病毒液制备了灭活苗,疫苗效力超过部颁标准。

英文摘要:

In order to further explore the effective method to improve the PRRSV titer in infected target cells, the Marc145 cell lines stably over-expressing CD 151 and (or) CD 163 protein were established by liposome mediated method following G418 screen- ing and single cell cloning technology. The successful expression of recombinant porcine CD151 and CD163 proteins was identified by fluorescent immunoeytoehemistry and western Blot. Small scale experiment was conducted in the GMP production workshop and, through the over-expression of PRRSV receptor CD151, CD163 or CD151 and CD163 coexpressing, the virus titer in Marc145 cells infected with PRRSV increased by more than 10 times. Finally, the virus was harvested and the inactivated Vaccine was pro- duced. The vaccine ettleacy was qualified and higher than the standard promulgated by the Ministry of Agriculture.

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期刊信息
  • 《中国兽医杂志》
  • 北大核心期刊(2014版)
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国畜牧兽医学会
  • 主编:张克家
  • 地址:北京市海淀区圆明园西路2号
  • 邮编:100193
  • 邮箱:vetzzhi@cau.edu.cn
  • 电话:010-62733040
  • 国际标准刊号:ISSN:0529-6005
  • 国内统一刊号:ISSN:11-2471/S
  • 邮发代号:2-137
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:19671